马俊 李博 王丽萍 许鸣

    胃癌是世界范围内难治性肿瘤之一，其发病率和病死率位居各恶性肿瘤前列[1-3]。化学治疗是胃癌的主要治疗方法，氟尿嘧啶作为胃癌化学治疗的一线药物，治疗剂量和中毒剂量较接近，使其应用受到一定的限制[4]。因此，探索如何提高化学治疗药物的疗效、减少其不良反应，成为近年研究的热点。笔者前期研究发现过度表达的微小RNA-345(miR-345)提示胃癌患者的术后生存期更短[5]。沉默miR-345表达可引起细胞周期进程的停滞而减慢细胞生长速度。本研究在前期研究基础上沉默胃癌细胞中miR-345的表达后，观察胃癌细胞在氟尿嘧啶作用下细胞生长速度、侵袭能力等变化情况，为增加胃癌化学治疗敏感性寻找到新的作用靶点，现报告如下。

    材料与方法

    一、材 料

    胃癌MGC803细胞购自南京凯基生物科技发展有限公司；LipofectamineTM2000购自Invitrogen公司；胎牛血清购自吉泰生物公司；Trizol购自 Invitrogen公司；RPMI1640培养基购自Gibco公司；miR-345的 逆转录和实时定量PCR引物由Invitrigen公司设计、合成；实时定量PCR检测试剂盒购自Roche公司；MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒购自Sigma公司。Transwell小室购自Corning公司。

    二、方 法

    1.细胞的培养

    胃癌MGC803细胞在5%CO2、37 ℃饱和湿度条件，于10%胎牛血清(Hyclone)的改良型RPMI1640下培养 ......