【摘要】 目的 建立穩定过表达IL-9的小鼠CT-26肿瘤细胞株及BALB/C小鼠皮下移植瘤模型，为后续研究IL-9在结肠癌肿瘤微环境中的作用及其机制提供实验基础。方法 将目的基因IL-9片段插入带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体GV492，构建重组过表达IL-9-GV492质粒，转染293T细胞后，用倒置荧光显微镜观察GFP的表达强度，用蛋白免疫印迹法检测IL-9的表达;包装病毒后检测病毒滴度。将过表达IL-9的慢病毒转染小鼠结肠癌CT-26细胞后，用倒置荧光显微镜观察GFP的表达强度，用流式细胞仪检测GFP及IL-9的表达，用qRT-PCR法检测IL-9的mRNA表达。过表达IL-9的CT-26细胞皮下接种BALB/C小鼠建立皮下移植瘤模型后，用免疫组化法检测肿瘤中IL-9的蛋白表达，用qRT-PCR法检测IL-9的mRNA表达。结果 阳性重组质粒PCR扩增产物大小约617 bp，DNA测序显示重组质粒的编码序列与目标序列完全一致 ......