材料与方法

    一、实验材料

    1. HaCaT细胞

    正常HaCaT细胞购买于赛百慷(上海)生物技术股份有限公司，分离自1例62岁患有黑色素瘤男性的正常外周皮肤。Dectin-1和CARD9基因敲除HaCaT(Dectin-1 ko和CARD9 ko)由课题组参照文献[11]通过CRISPR-Cas9技术敲除Dectin-1和CARD9基因构建，并经过蛋白验证和两基因验证保存于液氮中。

    2. 皮肤癣菌

    红色毛癣菌T1a从中国普通微生物菌种保藏管理中心获得，并经形态学鉴定以及内部转录间隔区和rRNA大亚基的D1-D2结构域测序确认。

    二、主要试剂与仪器

    DMEM培养基、TRIZOL试剂购自赛默飞世尔公司;沙保罗氏琼脂培养基购自江门市凯琳贸易有限公司;ELISA试剂盒购于联科生物;酶标仪(EON267603)。

    三、方 法

    1. 细胞培养

    HaCaT细胞用含有10%胎牛血清和1%双抗的高糖改良伊格尔培养基培养至长满细胞瓶 ......