张娟 李雪 蒋浩 黄晓萍

    【摘要】目的 观察竹节香附素A(RDA)对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法 分别使用0、5、10、20及40μmol/L的RDA干预HeLa细胞48 h，CCK-8实验测定细胞增殖率，计算半抑制浓度(IC50)，确定药物浓度。流式细胞术检测细胞凋亡，蛋白免疫印迹法检测细胞中B细胞淋巴瘤2家族蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、活化胱天蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的蛋白表达水平。将HeLa细胞分为4组，即空白对照组、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组、RDA组和联合用药组，檢测及比较各组细胞增殖率、凋亡率和p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量。结果 随着RDA浓度的增加，HeLa细胞的增殖率降低、凋亡率升高(P均 0.05)，见图2、表2。

    三、RDA对HeLa细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

    蛋白免疫印迹检测显示，与0 μmol/L组相比，10、20和40 μmol/L组3种蛋白磷酸化表达量均降低(P均 0.05)，见图2、表3。综合前述结果，采用40 μmol/L的RDA进行后续实验。

    四、激活PI3K/Akt/mTOR通路后RDA对HeLa细胞的影响

    检测与析因分析结果显示 ......