石雯 周抒

    宫腔粘连(IUA)是由于各种宫腔内操作导致子宫内膜基底层损伤、宫内感染以及机体内源性雌激素水平低下等引起子宫颈和(或)子宫腔内膜纤维化，宫腔容受性减小，出现部分或完全闭塞粘连。IUA 临床表现为月经量减少、闭经、周期性下腹痛、复发性流产及不孕等，是危害女性生殖及生理健康的一大疾病。IUA 具体的病因机制尚不清楚。大鼠具有与人类相似的月经周期及子宫生理解剖结构，且大鼠的双子宫结构提供了天然的实验对照，是建立IUA 模型进行相关病因机制研究的良好实验平台。本研究通过模拟人类子宫内膜机械损伤后IUA 状态，选取性成熟、未交配雌性SD 大鼠制作子宫内膜不同程度机械损伤动物模型，在损伤后的不同时间段进行取材切片后进行免疫组织化学(免疫组化)染色，观察大鼠宫腔不同时期不同机械损伤程度下的内膜情况，进一步探讨引起IUA 与子宫内膜病理性再生的相关病因机制并提供稳定、合适的动物实验模型。

    材料与方法

    一、材 料

    1. 实验动物

    健康、性成熟、未交配雌性SD 大鼠30 只，鼠龄9～11 周，体质量200～250 g，购于大连医科大学无特定病原体动物实验中心。所有大鼠遵循周期一致性原则，温度20～26 ℃，湿度50%～60%，光照昼夜比例统一，自由采食、饮水。实验动物的使用和处理过程均符合动物实验相关伦理规范。

    2. 药物与主要试剂

    包括：生理盐水，一抗为小鼠抗大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(MHC Ⅱ)抗体(稀释比1∶100)购自英国Abcam 公司，大鼠抗 5-溴脱氧尿苷(BrdU，稀释比1 ∶10)购自美国Bio-Rad 公司；二抗山羊抗小鼠 Ig 碱性磷酸酶(ALP，稀释比1∶100)购自英国Abcam 公司，山羊抗大鼠 Ig ALP(稀释比1∶100)购自英国Jackson 公司；免疫组化染色试剂蓝色碱性磷酸盐底物购自美国Vector公司，新品红基质试剂盒购自日本N-Histofine公司；水合氯醛粉剂购自天津市大茂化学试剂厂。

    二、方 法

    1. 实验动物的分组及处理

    按照配对比较法随机分组，将30 只雌性SD大鼠分成实验组与对照组，每组各15 只。其中，实验组大鼠左侧子宫行子宫内膜轻度机械损伤并设定为轻度机械损伤组，右侧子宫行子宫内膜重度机械损伤并设定为重度机械损伤组。对照组大鼠开腹后不进行子宫内膜损伤处理，进行假手术对照。

    2. 大鼠阴道涂片方法

    用毛细玻璃管吸取约50 μL 生理盐水 ......