余王琴 孔丽娅 罗玉玲 刘晓谷 郑小伟

    浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

    现代医学认为支气管哮喘是由肥大细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、气道上皮细胞、T细胞等参与的炎症性疾病，以气道高反应性、气道重塑为特征[1]。目前哮喘的发病机制尚不完全清楚，相关研究表明，Treg细胞与Th17细胞的免疫应答与哮喘的发病机制关系密切[2-4]。本实验以卵清蛋白致敏法结合多因素复合法建立肾气虚哮喘模型，通过大鼠脾脏流式细胞术，准确检测出Th17细胞占整个细胞亚群的百分比及其变化情况，为探究哮喘的发病及药物作用机制提供了理论依据。

    1 材料

    1.1 实验动物：清洁级Wistar雄性大鼠48只，体重200～250g，实验动物中心常规饲养。

    1.2 主要试剂：大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒和大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒(杭州诚维生物科技有限公司)；卵清白蛋白(Sigma有限公司)；胎牛血清(杭州天杭生物科技股份有限公司)；RPMI 1640培养基(凯基生物有限公司)；氢氧化铝分析纯(上海凌峰化学试剂有限公司)。

    1.3 实验药品：①益肾喘宁汤：主要由山药、山萸肉、熟地黄、泽泻、天浆壳、苦参、茯苓、牡丹皮、沉香片、五味子、黛蛤散、旋覆花、生黄芪等组成。将药液浓缩至2.4kg/L。②普米克令舒(吸入用布地奈德悬浮液)：2ml，1mg×5支/袋，批号：317935。

    2 方法

    2.1 动物分组：将48只大鼠饲养7天后随机分为正常组、哮喘组、肾气虚哮喘组(肾哮组)、中药组、西药组、中西药组(中西组)共6组 ......