陆永娟 陈芝芸 何蓓晖# 严茂祥

    1 浙江省嘉善县第一人民医院 浙江 嘉善 314100 2 浙江中医药大学附属第一医院 浙江 杭州 310006

    非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是无过量饮酒史、以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征，是临床常见的慢性肝病之一[1]。NAFLD的发病机制尚未完全阐明，肝脏脂质沉积是其发病的基础。近来研究发现，胆汁淤积、胰岛素抵抗、游离脂肪酸增多、氧化应激与脂质过氧化等代谢异常可以导致NAFLD的发生、发展，法尼酯衍生物受体(FXR)可以调节胆汁酸、糖、脂的代谢，可能参与NAFLD的发生发展。山楂叶总黄酮(TFHL)具有抗脂质过氧化、抑制或清除氧自由基、调节血脂、改善肝微循环及抗炎等作用。项目组前期研究发现，TFHL能明显改善高脂诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏脂质代谢紊乱，抗氧化应激，抑制炎性细胞因子的分泌等作用[2-3]。为进一步探讨TFHL的作用机制，本研究观察其对NAFLD模型大鼠肝组织FXR/固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1c)通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物：雄性SD大鼠40只，体重170±10g，SPF级，上海斯莱克实验动物有限公司，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。适应性喂养1周后进行实验。

    1.2 主要药品与试剂：TFHL(Lot：#20111211)，总黄酮含量>95%，由山西康立生药业有限公司提供；总RNA提取试剂盒(Cat：KD10111101-G)由爱思进生物技术(杭州)有限公司提供；cDNA合成试剂盒(Cat：BK1401)和荧光定量PCR试剂盒(Cat：BKA3206)由宝生物工程(大连)有限公司提供；引物由宝生物工程(大连)有限公司设计并合成，FXR上游引物：5’-AAGTGACCTCCCGACCA AGA-3’,下游引物：5’-TGGCATTCTCTGTTTGCTGT-3’,扩增片段107b；小异二聚体伴侣分子(SHP)上游引物：5’-TGCCTGGAGTCTTTCTGGAG-3’,下游引物：5’-ATGTTCTTGAGGGTGGAAGC-3’,扩 增 片 段227bp；SREBP-1c上游引物：5’-GCTTCTCTGGGCTCC TCTCT-3’ ......