江 砚 胡轶娟

    1 浙江省杭州市第一人民医院 浙江 杭州 310006 2 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

    骨髓间充质干细胞(MSCs)是一群存在于骨髓中的非造血干细胞，具有多向分化的潜能，在适宜的条件下能分化为成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉、神经元和骨髓基质细胞等，同时具有支持造血[1]和免疫调节功能[2]。MSCs作为骨髓基质细胞的前体细胞，是骨髓内造血微环境的重要组成部分。

    三黄三仙汤是由生黄芪、黄芩、黄精、仙鹤草、仙灵脾、仙茅为主方药物组成。其在临床用于再生障碍性贫血(AA)已取得一定疗效。前期研究证明，三黄三仙汤能加速恢复Se-137辐射小鼠的骨髓造血功能，故推测三黄三仙汤对MSCs有一定的干预作用。本文介绍三黄三仙汤对AA模型小鼠MSCs的干预作用研究，探讨其改善AA小鼠骨髓MSCs向成骨细胞分化的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料：分述如下。

    1.1.1 实验药品：三黄三仙汤：生黄芪、黄精、仙鹤草各30g，黄芩20g，淫羊藿、鸡血藤各15g，仙茅18g，女贞子、当归、白芍、麦冬各12g，煎煮浓缩后，分别配制成浓度为5.15g生药/ml、2.58g生药/ml和1.29g生药/ml的溶液(相当于人用剂量的16倍、8倍、4倍)。PBS缓冲液(吉诺生物医药技术有限公司)，胎牛血清(浙江天杭生物科技股份有限公司)，青霉素、链霉素溶液，DMEM低糖、高糖培养液，胰蛋白酶-EDTA溶液，MCDB-201培养基均购于gibco公司；茜素红(天津市天新精细化工开发中心)；MSC成骨诱导分化试剂盒(Biological Industries)。

    1.1.2 仪器：五分类血细胞分析仪(sysmex XT-1800I)，流式细胞仪(Flow Cytometer)，离心机(Beckman Allegra X-15R)，倒置显微镜(Nikon) ......