周华妙 郭 勇

    浙江中医药大学附属第一医院 浙江 杭州 310006

    乳腺癌是严重威胁全球女性健康的疾病之一，我国女性乳腺癌发病人数约24.9万,发病率37.86/10万，在近10年发病呈上升趋势[1]，但乳腺癌的总体生存状况明显好于其他常见恶性肿瘤，我国女性乳腺癌患者的5年生存率估计为73%，条件较好的大城市可达80%，而影响其死亡的仍然是复发转移。乳腺癌在中医学中多属于“乳岩”“乳石痈”，由于情志失调，肝气郁结或因冲任失调，气血运行不畅，气滞血瘀，热毒结滞于乳中而发病。而清热解毒法是中医治疗肿瘤的常用治法之一，并在长期的临床治疗中获得了一定的疗效[2]，但是其作用机制报道不多。本次实验中建立乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠模型，选用黄连解毒汤进行干预，观察其对乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠肿瘤细胞侵袭迁移能力，探寻对肿瘤相关巨噬细胞的影响及一些可能的相关机理。

    1 材料与方法

    1.1 动物：8周龄Balb/c小鼠，体重为18±2g，SPF级饲养；浙江中医药大学动物实验中心喂养(实验动物编号：0238458；0238459)。

    1.2 细胞株：小鼠乳腺癌4T1细胞株由浙江中医药大学动物实验中心细胞房提供。

    1.3 主要试剂与仪器：黄连解毒汤由浙江省中医院中药房熬制并于浙江中医药大学制剂中心浓煎后灭菌封装备用。灌胃工具由浙江中医药大学动物实验中心提供。基质胶(BD-P 253234)，Transwe11小室(Corning)，PBS(1×)(凯基)，DMEM高糖培养基(1×)(吉诺)，1640培养基(1×)(含双抗)(凯基)，胎牛血清(四季青)，0.25%胰酶-EDTA(吉诺)，BSA(MULTICELL)，结晶紫(达文)，移液枪(eppendorf)，离心机(Thermo)，荧光倒置显微镜(Zeiss) ......