基于基因多态性研究老年男性骨质疏松症肾虚证的发生机制*
等位基因,1材料与方法,2结果,3讨论
陈 瑜浙江省杭州市富阳区第一人民医院 浙江 杭州 311400
本研究结合老年男性骨质疏松症肾虚证临床观察和研究基础,以生物信息学、基因多态性检测等现代技术为手段,探讨VDR、AR、CYP19基因单核苷酸多态性(SNPs)的分布差异与骨密度之间的关系。
1 材料与方法
1.1 临床资料:选择我院汉族男性就诊者和体检者178例(年龄≤60岁),其中骨质疏松症肾虚证患者98例,体检肾虚证者80例。西医诊断标准参照《中国人骨质疏松症诊断标准专家共识(第三稿)》。中医证候诊断参照全国中西医结合虚证与老年病研究专业委员会1986年制定的标准和《中药新药临床研究指导原则》。排除继发性骨质疏松、其他严重疾病干扰骨代谢者、3月内使用过其他影响骨代谢药物的患者。
1.2 方法:分述如下。
1.2.1 骨密度测定:采用美国好乐杰QDR-4500双能X线骨密度仪检测患者正位腰椎(L2~L4),左侧髋部,包括股骨颈(Neck)、Wards三角、大转子(Torch)、股骨粗隆(Trock)的骨密度BMD(g/cm2)。
1.2.2 SNPs测定:采集所有受试者静脉血2.5ml,于EDTA抗凝管储存。提取外周血白细胞DNA于-20℃储存。①VDR基因等位基因测定:利用PCR对目的基因进行扩增,选用Fok I上游引物:5'-AGCTATGTAGGGCGAATCATGT-3',下游引物:5'-TCCAAGAGAGTCAGAGGAACATC-3' ......
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