林路宁 姬丽婷 傅云波 林益游 石坚宏 张叶慧 杨元宵 李昌煜#

    1 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

    2 杭州医学院 浙江 杭州 310053

    阿尔茨海默症(Alzheimer's disease，AD)是一种以进行性记忆减退、认知功能障碍为特征的神经退行性疾病，其发病机制尚未明确。近年来，越来越多的研究表明，肠道菌群通过“肠-脑”轴发挥对人体的调节作用，肠道菌群通过人体营养物质加工与吸收、炎症与免疫反应和神经递质合成与转运等作用影响AD[1-2]。同时，众多研究证明中药及其活性成分可以选择性促进益生菌或抑制致病菌的生长，从而改变肠道菌群的结构和功能，进而影响宿主[3]。石菖蒲为天南星科植物石菖蒲(Acorus tatarinowiiSchott)的干燥根茎，性温，味辛、苦，归心、胃经，具有开窍豁痰、醒神益智、化湿开胃之功。课题组前期研究发现，石菖蒲可以有效改善东莨菪碱所致的学习记忆障碍模型大鼠的学习记忆能力[4]，但是石菖蒲对肠道菌群的影响尚不清楚。本研究拟通过Morris水迷宫实验检测石菖蒲水提物对3xTg-AD小鼠学习记忆能力的影响，并运用16S rRNA测序技术探讨石菖蒲水提物对3xTg-AD小鼠肠道菌群的影响。

    1 实验材料

    1.1 试剂与仪器：石菖蒲饮片(浙江中医药大学中药饮片有限公司，批号180601)；E.Z.N.ATMMag-Bind soil DNA Kit(OMEGA，货号M5635-02)；Qubit2.0 DNA检测试剂盒(Life，货号Q10212)；2xTaq Master Mix(Vazyme，货号P111-03)；MagicPure Size Selection DNA Beads(Transgen，货号EC401-03)；Illumina MiSeq 测序仪(美国Illumina公司)；旋涡混合器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司，GL-88B)；均匀型干式恒温器(深圳拓能达科技有限公司，TND03-H-H)；Qubit2.0荧光仪(Invitrogen，Q32866)；热循环 PCR仪(BIO-RAD，T100TMThermal Cyeler)。

    1.2 实验动物：实验选用雄性5月龄APPswe/tauP301L/PS1M146V(3xTg-AD)小鼠和同窝生野生型C57BL/6J对照小鼠。3xTg-AD小鼠和野生型C57BL/6J小鼠均购自美国Jackson实验室，并由自主繁育纯化得到，质量合格证编号为SCXK(苏)2018-0008 ......