杭州市中医院 浙江 杭州 310007

    肽转运载体1(PepT1)主要表达于小肠刷状缘膜上,是蛋白质消化产物小分子肽(二肽、三肽)在小肠吸收的主要转运体。因此，PepT1的表达和功能直接影响蛋白质消化产物的吸收水平[1-3]。PepT1的底物很多，以β-内酰氨类抗生素头孢羟氨苄(Cefadroxil)最为常用，PepT1对头孢羟氨苄具有与二肽、三肽相同的底物特异性。即头孢羟氨苄在肠道内的吸收机理与二肽一样，均是通过 PepT1转运，而且头孢羟氨苄在肠道吸收后由于缺乏相应的降解酶而几乎不被降解[4-5]，因此，许多关于PepT1的研究都以头孢羟氨苄为底物[6-7]。

    四君子汤由人参、炙甘草、茯苓和白术4味药物组成，其主要功用是健脾益气，常用于治疗脾胃虚弱、运化无力等症，为治疗脾虚证的基础方。本研究以头孢羟氨苄为PepT1的底物，研究了脾虚模型大鼠服用四君子汤对PEPT1的表达和功能的影响。通过测定四君子汤对PepT1转运功能及蛋白、mRNA表达、底物的血药浓度的影响，以期为科学指导临床中西药合理联药提供理论依据。

    1 材料

    1.1 药品：党参、白术、茯苓、甘草购自浙江中医药大学中药饮片厂。以上四味药材按3∶3∶3∶2的比例混合后，加10倍量水煎煮2次，每次1小时，合并滤液后浓缩，冷藏过夜，离心，取上清液稀释至2g药材/ml，作为四君子汤药液。

    1.2 仪器与试剂：安捷伦高效液相色谱仪(Agilent 1200)；台式高速冷冻型微量离心机(D3024R，Dragon‐Lab)；荧光定量PCR仪(Stepone plus，ABI)；超微量分光光度计(NanoDrop2000，Thermo)；利血平(Reserpine,Sigma,Lot WXBC4865V)；PepT1抗体(ABACM，Ab203043)；头孢羟氨苄标准品cefadroxil(中国食品药品检定研究院 ......