杨晴柔 陈芝芸 何蓓晖 叶 蕾 严峻彬 严茂祥#

    1 绍兴市第七人民医院 浙江 绍兴 312000

    2 浙江中医药大学附属第一医院 浙江 杭州 310006

    肝纤维化(HF)是多种慢性肝病的最常见病理特征，可进展为肝硬化，最终导致肝癌。肝纤维化尚有逆转的可能，因此，寻找有效地抗肝纤维药物，具有重要的临床意义。中医药在抗肝纤维化方面具有独特的优势和巨大潜力；其抗肝纤维化的机制包括调控多条细胞信号传导通路，抑制肝脏炎症，抗脂质过氧化损伤，抑制肝星状细胞(HSCs)的活化和增殖，调节纤维化因子的合成和分泌，以及调节合成和细胞外基质(ECM)的降解等[1]。近年来的研究发现，Hippo信号通路参与肝纤维化的发生发展[2]。补肾化瘀方是课题组多年用于治疗肝纤维化的中药复方，前期机制研究发现，该方能通过调控Hh信号通路、TGF-β1/smad3信号通路等的异常激活，抑制肝脏炎症和HSC的活化，抗肝纤维化进展[3-4]。为了进一步探讨补肾化瘀方抗纤维化的“多途径”多环节”“多靶点”作用机制，本研究观察该方对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化大鼠肝组织Hippo信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物：SD雄性大鼠40只，SPF级，体重140±10g，SPF级，购自上海斯莱克实验动物有限公司[SCXK(沪)2013-0016]；饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心，适应性喂养1周后开始实验造模。

    1.2 药物与试剂：补肾化瘀方由仙灵脾、女贞子、黄精、党参、虎杖、丹参、郁金、积雪草(比例1.25∶1.25∶1.67∶1.25∶2∶2.5∶1∶1.25)等组成，由本院制剂室制成流浸膏。CCl4(批号：20140319)由上海凌峰化学试剂有限公司提供；总RNA提取试剂(批号：AK1703)、逆转录试剂盒(A140832A)、TB Green荧光定量 PCR试剂(批号：AH80345A)为宝生物工程(大连)有限公司产品；总蛋白提取试剂盒(批号：20190425)为江苏凯基生物技术股份有限公司产品；10%TGX Stain-FreeTMFastCastTMAcrylamide Kit(批号：64096791)为美国BIO-RAD公司产品 ......