王绪平 张 扬# 黄孝闻 王娜妮 张 丽 张子玥 寿 旦

    1 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

    2 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

    3 上海财经大学浙江学院 浙江 金华 321013

    糖尿病性骨质疏松症(DOP)是糖尿病并发骨量减少，易骨折的疾病，近年发病率呈上升趋势。目前DOP的治疗存在疗效不确切、药物不良反应等问题[1]。因此寻找安全有效的DOP治疗药物具有重要价值和现实意义。

    中医学认为DOP属于“消渴”“骨痿”范畴，补肾固本是其治疗大法[2]。补肾健骨类中药淫羊藿、骨碎补、补骨脂、菟丝子、女贞子等是治疗该症的中药，文献资料表明该类中药具有促进骨愈合的作用[3，4]。有关DOP的研究表明，高浓度葡萄糖对成骨细胞的增殖、分化和矿化产生明显的抑制作用[5，6]。胰岛素受体底物(IRS1)作为调节β细胞功能的重要信号分子，通过PI3K通路调节胰岛素分泌[7]。PI3K/AKT通路也与骨代谢关系密切。胰岛素依赖型糖尿病通过抑制AKT，减弱骨形成[8]。

    本研究拟拓展对补肾健骨类中药在骨类疾病中的作用研究，通过建立高糖诱导的成骨细胞模型，检测IRS1表达，阐明淫羊藿苷等补肾健骨类中药活性成分保护高糖诱导成骨细胞的作用机制，为中药在DOP的研发方面提供研究基础。

    1 仪器与试剂

    1.1 实验动物：新生大鼠由浙江省中医药研究院动物房提供，购于浙江省动物实验中心，动物实验许可证号：SYXK(浙)20190010。

    1.2 仪器：311型二氧化碳细胞培养箱(Thermo Scientific，USA)；ECLIPSE Ti型倒置荧光显微镜(Nikon，Japan)；microfuge 20R小型高速冷冻离心机(BECKMAN COULTER)；Spectra Max 190全波长酶标仪(Molecular Devices，USA)；NEST细胞培养板培养皿(无锡耐思生物科技有限公司)；AE240电子天平(Switzerland)；超低温冰箱(Thermo，USA)；超低温冰箱(Thermo，USA)；美国ABI RT-PCR仪。

    1.3 药品及试剂：柚皮苷(中国药品生物制品检定所，批号：110722-201910)；补骨脂二氢黄酮(宝鸡市辰光生物科技有限公司，批号：20191103)；淫羊藿苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110703-201809)；DMEM培养基(吉诺生物医药技术有限公司，批号：1712201806)；胎牛血清(Gibco ......