周 洁 徐 攀 胡轶娟 楼柯浪 吴晓俊 梁卫青 张宏建 浦锦宝#

    1 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

    2 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

    前胡为伞形科植物白花前胡Peucedanum praeruptorum Dunn的干燥根。主要分布安徽、浙江、贵州、云南、四川等地。《本草汇言》一书[1]中提到，“前胡，散风寒、净表邪、温肺气、消痰嗽之药也。如伤风之证，咳嗽痰喘，声重气盛，此邪在肺经也。”而据《本草纲目》记载，前胡“清肺热，化痰热，散风邪”[2]。现代药理学研究发现其具有降气化痰，宣散风热的功效，可用于肺气不降所致的痰热喘满，咯痰黄稠，风热咳嗽痰多。前胡在临床上治疗气道炎症有较好的疗效[3]，但其对H2O2处理氧化应激刺激下增殖影响未见文献报道。

    氧化应激与气道炎症关系密切，气道炎症能促进气道重塑，而气道重塑中，气道平滑肌细胞的增生有着重要的作用[4]。研究表明，氧化应激可刺激支气管平滑肌细胞(HBSMSCs)增殖，进而导致气道炎症的发生和加重[5-6]。H2O2是一种体内氧自由基，属于活性氧家族成员之一。利用不同浓度H2O2刺激离体HBSMSCs的方法能近似地模拟自然状态下气道炎症的氧化应激状态[7]。气道炎症与氧化应激反应关系密切，氧自由基可激活NF-κB及某些细胞因子(如IL-8)等，对机体组织细胞产生氧化作用，这在气道炎症的发病机制中已得到广泛的认可[8]。

    本研究在离体的人源支气管平滑肌细胞上，予不同浓度H2O2刺激不同时间的方法形成体外氧化应激模型。HBSMC经H2O2刺激后可以使细胞增殖率增加，由此可确定体外氧化应激模型造模成功。观察H2O2处理氧化应激刺激后，用前胡有效成分及不同产地前胡粗提物干预后支气管平滑肌细胞增殖影响。

    1 仪器与试剂

    1.1 试剂：RPMI-1640培养液、胎牛血清(Hyclone公司)；CCK-8、DMSO(Sigma公司)；0.25%胰蛋白酶EDTA、PBS缓冲液、1%青链霉素(Gibco公司)；10cm培养皿、96孔培养板(Corning公司) ......