兰乐健 洪 滟 彭健韫 桂志红

    1 丽水市人民医院 浙江 丽水 323000

    2 丽水市中心医院 浙江 丽水 323000

    肾癌是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤，90%以上的肾癌都是肾细胞癌(RCC)。局限性RCC可通过肾脏根治性切除或肾脏部分切除进行治疗，然而，转移性RCC由于对常规化疗和放疗均不敏感，存在治疗难、预后差及致死率高等特点[1]。我国具有丰富的天然药物资源，寻找具有抗肿瘤活性的天然药物分子，可以为治疗肾癌提供新策略。丹酚酸B(SalB)是丹参主要的水溶性组分之一，被证明具有抗炎、抗氧化、调节凋亡、抑制血小板聚集等功能，近期研究表明，SalB可以很好地抑制宫颈癌、肝癌、白血病等癌细胞的恶性增殖，同时可以逆转结肠癌等肿瘤细胞的多药耐药性[2]。然而，SalB是否可以有效抑制肾细胞癌的恶性增殖却不清楚。因此，我们选取人肾透明细胞腺癌(ccRCC)细胞786-O，研究了SalB对786-O细胞生长、凋亡的影响及对应的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂：ccRCC细胞786-O购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库。实验用MTT、RPMI1640培养基、Annexin V-FITC和PI凋亡检测试剂盒、ROS检测试剂盒、结晶紫、胰酶、RIPA细胞裂解缓冲及胎牛血清(FBS)等均购自上海碧云天生物技术公司。AKT、Bim、Bcl-2、Bax及Caspase-3基因的引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司设计合成。AKT单克隆抗体(货号：4691T)、pAKT(Ser473)单克隆抗体(货号：4060T)、Bim单克隆抗体(货号：2933T)、Bcl-2单克隆抗体(货号：15071T)、Bax单克隆抗体(货号：89477S)、Caspase-3单克隆抗体(货号：14220T)、β-Actin单克隆抗体(货号：4970T)，以及对应的鼠二抗(货号：4410S)、兔二抗(货号：2366)均购自Cell signaling technology公司。RNA iso Plus RNA提取试剂盒和PrimeScript RT试剂盒及QPCR试剂盒购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。SalB标准品购自阿拉丁试剂有限公司 ......