郑 娅 董其武 王兆婷

    宁波市康复医院 浙江 宁波 315040

    缺血性脑卒中在我国脑卒中患者数量中居首位。患者人群中，老年人占比最大，给国家经济带来了较重的负担[1-2]。临床上以抗血小板凝集、强化降脂等治疗方法为主，虽已取得了较好的疗效，但早期复发率高达30%，且伴随着高致死率和高致残率，所以减轻其复发率是现如今研究的重点。治疗该疾病的根本是对缺血部位及时恢复供血[3-4]，一些研究结果显示，对脑缺血部位及时供血虽可恢复缺血部位的正常功能，不过也会造成脑缺血再灌注损伤(CIRI)[5]。因此，寻找价格低廉、切实有效的防治CIRI的药物是目前研究的热点。

    脑卒中可归属于中医学“中风”范畴[6]。地黄饮子(DY)，为《古代经典名方目录(第一批)》，其药物组成为熟地黄、白茯苓、麦门冬、石菖蒲、附子、五味子、官桂、远志、山茱萸、石斛、肉苁蓉等，在临床上防治脑卒中效果较好[7-9]。地黄饮子在动物实验中有较好的表现，对于CIRI所引发的神经损伤有一定的缓解作用，使脑梗死率降低，缓解脑卒中病理改变[10-11]，课题组前期研究发现脑缺血再灌注模型大鼠血小板LC3、Beclin1蛋白显著增加，地黄饮子干预后能有效降低自噬水平。基于此，本实验进行进一步探究，研究地黄饮子是否通过减轻血小板自噬降低CIRI的损伤。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：从上海西普尔-必凯实验动物有限公司购买的50只40周雄性SD大鼠，体质量500～700g，动物生产许可证号SCXK(沪)2018-0008，在杭州鹰旸生物科技有限公司动物中心饲养，动物使用SYXK许可证号(浙)2020-0024。实验前适应性饲养，室温为22±2℃，相对湿度为60%。

    1.2 实验材料与试剂：地黄饮子，由本院中药房提供。其方剂组成：熟地黄18g，茯苓、山茱萸、肉苁蓉各12g，麦门冬、石斛、巴戟天各10g，远志9g，石菖蒲8g，五味子6g，附子、肉桂、薄荷各4g，生姜3g，大枣5个。以上中药浸泡在5倍体积的水中45min，后在沸腾温度下煎煮半小时，取出煎液。在3倍体积的水中继续煎煮两次，最后将汤液全部收集，过滤，浓缩至2g/ml，4℃冰箱保存。Beclin-1、Phospho-IKB epsilon(Ser161)、LC3 A/B、APG5L/ATG5、GAPDH、CD62P Antibody(批号：AF5128、AF3002、AF5402、DF6010、AF1027、DF13294 ......