孟箭 郭伟 张志愿 任国新 竺涵光 何悦 周晓健

    (1.东南大学医学院附属徐州市中心医院 口腔科，江苏 徐州 221009；2.上海交通大学医学院附属第九人民医院 口腔颌面外科，上海 200011)

    肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)基因转导肿瘤引流淋巴结细胞(drainage node of lymphocytes，DNL)后发现其外缘性基因能够表达，分泌高活性的TNF，在体外具有强大的抗肿瘤活性[1]。TNF-α基因转导的舌鳞癌DNL瘤周注射比静脉输注到达瘤体的浓度高[2-3]。但体内是一个复杂的环境，体内抑瘤效果尚不清楚。本实验在建立人舌鳞癌SCID鼠移植瘤模型的基础上，观察局部应用TNF-α基因转导的DNL以及联合应用低剂量平阳星(Pinyancin，PYC)对人舌鳞癌的抑瘤效果，并对其机制进行探讨，以期为临床免疫化疗提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    选取由上海市肿瘤研究所动物房提供的SCID鼠15只，4～6周龄，体重18～24 g，在SPF条件下饲养。

    1.2 制备舌鳞癌TNF/DNL

    制备舌鳞癌TNF/DNL的方法见参考文献[1]。

    1.3 荷瘤SCID鼠模型的建立

    人舌鳞癌Tca8113细胞株(上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科)解冻复苏，37℃、5%CO2条件下于含10%小牛血清的RPMI1640培养基中培养。取对数生长期贴壁生长的细胞，经0.25%胰蛋白酶消化后，用PBS缓冲液洗涤3次，计数后配成浓度为每升1×1010个的肿瘤细胞悬液，给SCID鼠皮下注射0.2 mL。

    1.4 实验分组

    将15只实验动物随机分为3组，即对照组、TNF/DNL加重组白细胞介素-2(recombinant interleukin-2，rIL-2)组和TNF/DNL加rIL-2加PYC组，每组5只。对照组在SCID鼠皮下注射等量生理盐水。TNF/DNL加rIL-2组：在肿瘤接种12 h后于肿瘤部位注射浓度为每升5×1010个的TNF/DNL 0.2 mL，腹腔注射1×104U·mL-1rIL-2 0.2 mL。TNF/DNL加rIL-2加PYC组：肿瘤接种12 h后腹腔注射0.5 g·L-1的PYC 0.2 mL，12 h后接种部位注射浓度为每升5×1010个的TNF/DNL 0.2 mL，腹腔注射1×104U·mL-1rIL-2 0.2 mL ......