王家凤 张志民 王成坤 聂代邦 高文信

    (1.吉林大学口腔医院 牙体牙髓病科，吉林 长春 130021；2.吉林大学农学部 动物技术系，吉林 长春 130062)

    X-性染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP)参与了多种恶性肿瘤的增殖与转化，其表达水平与肿瘤的发生、预后以及化疗耐药密切相关[1]。口腔鳞状细胞癌是颌面部常见的肿瘤之一，本研究旨在探讨XIAP在人口腔鳞状细胞癌细胞中的表达水平，并分析XIAP表达与Tca8113细胞化疗耐药之间的关系，为肿瘤的治疗提供依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料来源

    人舌鳞癌细胞系Tca8113细胞(由中国科学院上海细胞所提供)，IMDM培养基、甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)试剂(长春宝泰克公司)，平阳霉素(Pingyangmycin，PYM)(吉林大学口腔医院药房)，逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain raction，RT-PCR)试剂盒、PCR-marker、DNA回收试剂盒、T载体(Takara公司，日本)，XIAP引物合成送至长春宝泰克公司完成。

    1.2 细胞的培养和处理方法

    在37℃、5%CO2培养箱中，使用含10%新生牛血清的IMDM培养液培养Tca8113细胞。取对数生长期Tca8113细胞，培养液中加入PYM，使其终浓度为0.5 μg·mL-1，用该药物作用72 h，弃去含PYM的培养液，再用正常培养液冲洗3次，然后加入新鲜正常培养液培养72 h，待细胞恢复正常生长，重复上述步骤1次后，将药物浓度提高1倍进入下1个培养周期。重复以上步骤，直到Tca8113细胞能够维持在药物浓度分别为1、10 μg·mL-1的培养液中正常生长，而成为耐药Tca8113细胞，命名为Tca8113-1、Tca8113-10 ......