刘娟 赵红宇 轩东英 谢宝仪 章锦才

    (广东省口腔医院·南方医科大学附属口腔医院 牙周病科，广东 广州 510280)

    人牙周膜细胞群多向分化潜能的实验研究

    刘娟 赵红宇 轩东英 谢宝仪 章锦才

    (广东省口腔医院·南方医科大学附属口腔医院 牙周病科，广东 广州 510280)

    目的 研究体外培养的人牙周膜细胞群(hPDLP)向成骨和成脂方向分化的潜能，为牙周组织工程提供可靠的种子细胞来源。方法 组织块法分离培养人牙周膜细胞群，流式细胞术检测间充质干细胞标记CD146和STRO-1的表达；利用茜素红、油红O染色、免疫组化以及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)等检测hPDLP的多向分化标志。结果 第1代hPDLP的CD146和STRO-1阳性率分别是27.20%±3.98%和4.23%±4.08%；经矿化诱导可以形成矿化结节，有钙盐沉积；经成脂诱导可见特异性脂滴形成，特异性转录因子过氧化物酶体激活物增生受体2(PPARγ2)和脂蛋白脂酶(LPL)表达上调。第8代hPDLP相对第1代的矿化能力没有差异，但成脂方向分化潜能减弱。结论 体外培养的hPDLP具有向成骨和成脂样细胞分化潜能，第1～3代细胞群明显具有牙周膜干细胞的多向分化潜能优势。

    人牙周膜细胞群； 分化潜能； 矿化； 诱导

    近年来，研究者[1-4]发现，牙周膜细胞具有异质性，包含异质性细胞群,即由不同的亚型组成,细胞间存在差异,在表现型及功能上有所不同,其子代能增殖产生成纤维细胞、成骨细胞和成牙骨质细胞。这些细胞亚型可处于不同的分化阶段或具有不定向的分化趋势，牙周组织再生修复与牙周膜细胞的异质性有密切关系。牙周膜细胞作为一个细胞群体,具有很强的分化增殖能力，其中含有大量未分化的功能细胞。2004年Seo等从牙周膜中分离并培养了间充质样干细胞，发现这些细胞表面表达间充质干细胞的表面标记STRO-1和CD146/MUC18，体外培养能够形成牙周膜样结构，并首次提出了人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cell，hPDLSC)的概念。牙周膜干细胞同其他组织的成体干细胞一样，目前尚缺乏特异性的表面标记对其进行鉴定和分离纯化。本实验拟通过研究具有异质性人牙周膜细胞群(human periodontal ligament cell population，hPDLP)的多项分化潜能，揭示hPDLP的干细胞成分特征，为以牙周膜细胞群为种子细胞的牙周组织工程研究奠定实验基础。

    1 材料和方法 ......