王磊 李耀俊 章燕 潘可风 黄远亮 刘昌胜 蒋欣泉

    (1.上海市长宁区虹桥街道社区卫生服务中心口腔科,上海200051;2.同济大学附属东方医院口腔科,上海200120; 3.同济大学附属口腔医院口腔颌面外科,上海200072;4.华东理工大学材料科学与工程学院，上海200237; 5.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔生物工程实验室,上海200011)

    新型多孔磷酸钙复合骨髓基质干细胞组织工程实验研究

    王磊1李耀俊2章燕3潘可风3黄远亮2刘昌胜4蒋欣泉5

    (1.上海市长宁区虹桥街道社区卫生服务中心口腔科,上海200051;2.同济大学附属东方医院口腔科,上海200120; 3.同济大学附属口腔医院口腔颌面外科,上海200072;4.华东理工大学材料科学与工程学院，上海200237; 5.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔生物工程实验室,上海200011)

    目的观察新型生物材料多孔磷酸钙的生物相容性及复合骨髓基质干细胞(BMSCs)异位成骨情况。方法体外培养第2代Beagle犬BMSCs，转染绿色荧光蛋白(GFP)后与多孔磷酸钙(CPC)复合培养，获得最佳复合浓度，倒置和荧光显微镜、扫描电镜下观察BMSCs黏附和生长情况，复合体植入裸鼠皮下8周观察异位成骨。结果BMSCs转染GFP与多孔CPC复合培养1 d，细胞从材料中爬出，形态正常，7 d可见细胞伸出伪足，分泌基质；复合体可异位成骨。结论多孔CPC生物相容性好，是一种较理想的骨组织工程支架材料。

    多孔磷酸钙；骨组织工程；支架材料；骨髓基质干细胞

    组织工程支架材料是组织工程化骨的最基本构架。按照材料的化学特性分类，应用在组织工程支架的材料有无机材料、有机材料和复合材料等。组织工程支架材料不仅影响细胞的生物学行为和培养的效率，而且决定着移植后能否与机体适应、结合和修复，是能否应用于临床的关键因素[1]。良好的细胞支架材料可为特定细胞提供结构支撑和模板引导作用。无机生物材料的成分与骨相似，降解产物易于机体内代谢或吸收，无明显副作用。本实验通过观察新型无机生物材料自固化多孔磷酸钙(calcium phosphate cement，CPC)复合Beagle犬骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)体外黏附、生长和体内异位成骨的情况，筛选适于种子细胞发挥生理功能的骨组织工程支架材料。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料和仪器

    自固化多孔磷酸钙人工骨(上海瑞邦生物材料有限公司)、重组腺病毒Adv-GFP(北京大学生命科学院)、恒温CO2培养箱(Quene System公司 ......