赖仁发 赵清桐 刘湘宁 沈山

    (暨南大学附属第一医院 口腔颌面外科，广东 广州 510632)

    可注射型组织工程骨是利用初始状态为液态的生物材料加入种子细胞或生长因子复合后，动态下注射入体内骨缺损处，逐步固化，形成固态或凝胶的组织工程骨，以修复各类骨缺损[1-2]。本研究所选用的壳聚糖(chitosan，CS)/β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate，β-TCP)初期凝胶状结构非常利于血管的长入和骨组织再生，易于塑形，并能够很好地复合种子细胞或生长因子，发挥其缓释作用，凝固后具有一定的生物力学强度，其降解速度较为缓慢，材料在完成支持结构功能后能完全降解吸收，适应了微创外科技术发展的要求，具有组织损伤小、操作简便等优点。骨形态发生蛋白是在骨基质中存在的一种骨诱导活性蛋白，以其高效成骨活性而获公认[3-4]。本研究将CS/β-TCP与重组人骨形态发生蛋白(recombinant human bone morphogenetic protein，rhBMP)-2复合，在流动状态下注射进兔下颌骨缺损模型中，观察骨缺损修复情况，以期为临床开发一种较为理想的可注射性骨替代材料提供实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料和设备

    液相CS溶液(脱乙酰度为93%，相对分子质量为942 000)、固相β-TCP粉末(钙磷比1.50，直径50μm)(暨南大学理工学院材料与工程系提供)，rhBMP-2(暨南大学生物医学工程研究所研制)。将CS 0.3mL、β-TCP 2.2 g和rhBMP-2 0.5mg各12份独立包装，用照射剂量为2Gy的γ射线照射消毒之后备用。

    24只成年新西兰大白兔(广东省实验动物中心提供)，雌雄不限，选自同一批次，体重约2.0 kg，同一环境下饲养。

    XU850数码照相机(佳能公司，日本)，X线牙片机(Trophy Trex公司，日本)，Quin Plus荧光显微镜、SP1600硬组织切片机(Leica公司，德国)，Lunar Prodigy骨密度仪(GE公司，美国)，荧光染料(Sigma公司，美国)。

    1.2 方法

    模型建立：用30 g·L-1戊巴比妥钠0.03 g·kg-1沿兔耳缘静脉注射，全身麻醉，正中联合后1.5 cm沿下颌骨走行做2.0 cm长弧形切口，在下颌骨下缘手术区肌层和骨膜下注射含肾上腺素的利多卡因2mL行浸润麻醉。切开双侧下颌骨下缘皮肤、皮下组织、肌肉和骨膜，用齿科低速慢钻在双侧下颌骨体部形成15mm×6mm的全层缺损 ......