李斌龙 谢晓莉 彭解英 罗小良 靳路远

    (中南大学湘雅医院 口腔内科，长沙 410008)

    大蒜素对尼古丁致人牙周膜成纤维细胞氧化毒性的保护作用

    李斌龙 谢晓莉 彭解英 罗小良 靳路远

    (中南大学湘雅医院 口腔内科，长沙 410008)

    目的 研究大蒜素对尼古丁所致人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs)氧化毒性的保护作用。方法 1)建立尼古丁对HPDLCs氧化毒性的模型，采用水溶性四氮唑(WST)比色法选出可有效抑制HPDLCs存活率的尼古丁质量浓度X，用于后续实验。2)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组(大蒜素质量浓度分别为15、30、60μg·mL-1)，以不同培养液培养24 h后，采用WST比色法选出可显著改善HPDLCs存活率的大蒜素质量浓度Y用于后续实验。3)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组，分别于培养1、4、8、12、24 h后测量细胞内谷胱甘肽(GSH)浓度。结果 0.8mg·mL-1尼古丁即可显著抑制HPDLCs存活率(细胞存活率为空白组的77%，P<0.05，取X为0.8mg·mL-1)；而60μg·mL-1大蒜素可显著改善此负性作用，将细胞存活率提升至尼古丁组的112%(P<0.05)，且与空白组比较无统计学差异(P>0.05)，取Y为60μg·mL-1。在培养后的各时间点，尼古丁+大蒜素组GSH浓度与空白组相比均无统计学差异(P>0.05)，但较尼古丁组均有明显提高(P<0.05)；培养8 h时，尼古丁+大蒜素组GSH浓度与尼古丁组相比差异最大，前者较后者提高82%。结论 60μg·mL-1大蒜素可以显著降低尼古丁对HPDLCs的氧化损伤作用。

    人牙周膜成纤维细胞； 尼古丁； 氧化毒性； 大蒜素； 谷胱甘肽

    吸烟是牙周病的重要危险因素。烟草中的尼古丁可以对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells，HPDLCs)产生剂量相关的氧化毒性[1-2]，促进牙周病的发生和发展。大蒜素是从大蒜中提取的天然抗氧化剂，已用于治疗口腔溃疡和难治性根尖周炎等疾病[3]。目前，关于大蒜素是否可抑制尼古丁氧化毒性作用的研究还较少，本实验即对此进行研究，以便为大蒜素用于牙周病的治疗提供实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂和仪器

    尼古丁(Sigma公司，美国)、大蒜素针剂(山东鲁抗辰欣药业有限公司)、DMEM培养基(Gibco公司 ......