沉默DNA结合抑制蛋白-1基因对腺样囊性癌细胞生长和侵袭能力的影响
脂质体,空白对照,1材料和方法,2细胞培养,3RNA干扰,4免疫荧光确认干扰成功,5RNA干扰前后的RT-PCR和Westernblot检测,6细胞生长曲线,7细胞侵袭性,8统计学分析,2结果
刘培 张向红 胡振生 孙善珍 刘少华 魏奉才(1.山东大学齐鲁医院 整形外科; 2.山东大学医学院 组织胚胎学教研室;
3.山东大学口腔医院 病理科;4.山东大学齐鲁医院 口腔科研究室,济南 250012)
沉默DNA结合抑制蛋白-1基因对腺样囊性癌细胞生长和侵袭能力的影响
刘培1张向红2胡振生1孙善珍3刘少华4魏奉才4
(1.山东大学齐鲁医院 整形外科; 2.山东大学医学院 组织胚胎学教研室;
3.山东大学口腔医院 病理科;4.山东大学齐鲁医院 口腔科研究室,济南 250012)
目的 探讨DNA结合抑制蛋白-1(Id-1)基因在腺样囊性癌细胞生长和侵袭行为中的作用。方法 以涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M和ACC-2为研究对象,免疫荧光检测Id-1基因的表达;用小干扰RNA进行Id-1基因的RNA干扰;于干扰前后应用RT-PCR和Western blot检测2个细胞系Id-1表达情况;于干扰前后应用MTT法检测细胞的生长情况及用Transwell小室检测细胞的侵袭能力。结果 在ACC-M和ACC-2中,Id-1均有表达,ACC-M表达量高于ACC-2;通过RNA干扰沉默Id-1基因后,ACC-M和ACC-2的生长和侵袭能力均受到抑制。在受抑制程度上,ACC-M比ACC-2更为强烈。结论 鉴于Id-1对ACC细胞生长和侵袭行为的重要影响,干扰Id-1基因的表达,有望成为治疗腺样囊性癌新的有效方法之一。
DNA结合抑制蛋白-1; 腺样囊性癌; 增殖; 侵袭
腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)是发生于头颈部涎腺最常见的恶性肿瘤,约占所有恶性肿瘤20%[1],具有高度的侵袭和转移特性[2]。由于对ACC生物学性质认识上的局限性,目前尚无很有效的治疗措施,即使进行了广泛的手术切除及放射治疗,大多数患者最终还是出现复发和转移[3]。临床上急需寻求治疗ACC的新方法。
DNA结合抑制蛋白(inhibitor of DNA binding,Id)属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)转录调节因子家族,在细胞生长和分化方面具有广泛的调节作用。Id蛋白有4个家族:Id-1、Id-2、Id-3、 Id-4,目前研究[4-5]发现:Id-1与人类多种肿瘤的发生发展有密切的关系。然而在ACC中,Id-1的表达量如何,其对ACC的生长和侵袭能力的影响尚不得而知。
ACC-M和ACC-2分别是涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株和低转移细胞株 ......
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