侵袭性牙周炎与慢性牙周炎病变位点中人巨细胞病毒的定量检测
载量,1材料和方法,1研究对象,2临床观察指标,3龈下标本的采集与处理,4龈下样本DNA抽提,5标准品来源,6标准品DNA模板的制备,7荧光定量PCR反应体系的建立,8龈下样本的检测,9统计分析,2结果
李潇 孙钦峰 孙允东 葛少华 杨丕山(1.山东大学口腔医院 牙周科,山东省口腔生物医学重点实验室;2.山东大学医学院 医学微生物学教研室,济南 250012)
侵袭性牙周炎与慢性牙周炎病变位点中人巨细胞病毒的定量检测
李潇1孙钦峰1孙允东2葛少华1杨丕山1
(1.山东大学口腔医院 牙周科,山东省口腔生物医学重点实验室;2.山东大学医学院 医学微生物学教研室,济南 250012)
目的 应用实时荧光定量PCR方法检测侵袭性牙周炎(AgP)及慢性牙周炎(CP)患者龈下样本中人巨细胞病毒(HCMV)的DNA载量,探讨HCMV感染与牙周炎之间的关系。方法 选择18例AgP患者、24例CP患者及15例牙周健康对照者,收集龈下样本114例。构建含有HCMV高保守片段的重组质粒,制备标准品DNA模板,建立并应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测样本中HCMV的DNA载量。结果 AgP病变位点、CP病变位点以及牙周健康位点中HCMV的阳性检出率分别为58.3%、41.7%和6.7%。AgP和CP病变位点中HCMV的阳性检出率显著高于牙周健康位点(P<0.01)。在AgP病变位点中,病毒载量在104以上的位点占33.3%,明显高于CP病变位点的10.4%,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HCMV感染与牙周炎的发生发展密切相关,其活动性感染可能与AgP组织破坏的迅速进展有关。
人巨细胞病毒; 侵袭性牙周炎; 慢性牙周炎
牙周炎是一种慢性感染性疾病,其发生发展受到多种因素的影响。存在于菌斑生物膜中的牙周可疑致病菌及其产物是引发牙周疾病的始动因子。然而,单纯的细菌感染学说不能很好地解释牙周组织破坏局限化及阵发性破坏加速等现象。近年来,学者[1]提出某些疱疹病毒可能与牙周炎的发病有关,牙周局部组织的疱疹病毒感染可以在一定程度上解释牙周炎的某些临床表现。其中,人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)被认为是与牙周炎关系最为密切的一种疱疹病毒。由于不同种族人群病毒感染情况存在差异,以及研究者选用的检测方法不同,导致各研究机构的HCMV检测结果存在较大差异[2-3]。HCMV与牙周炎之间的关系尚存在争议,需要进一步研究探讨。侵袭性牙周炎(aggressive periodontitis,AgP)和慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)是临床表现和实验室检查均有明显差异的2种牙周炎[4],HCMV DNA载量在AgP和CP的病变位点中是否存在差异目前尚未明确 ......
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