郑义 马宁 胡小燕 张莉

    (1.吉林大学口腔医院 牙周病科，长春 130021；2.山东大学医学院 生物化学研究所，济南 250012；3.吉林大学口腔医院 急诊科，长春 130021)

    伴放线放线杆菌对2型糖尿病患者多形核白细胞分泌白细胞介素-6和凋亡的影响

    郑义1马宁1胡小燕2张莉3

    (1.吉林大学口腔医院 牙周病科，长春 130021；2.山东大学医学院 生物化学研究所，济南 250012；3.吉林大学口腔医院 急诊科，长春 130021)

    目的 研究2型糖尿病患者多形核白细胞(PMN)分泌功能和凋亡情况以及伴放线放线杆菌(A.actinomycetem)对其的影响。方法 Percoll不连续梯度离心法分离非糖尿病者和2型糖尿病患者外周血中的PMN，实验组的PMN加入A.actinomycetem的超声滤液刺激，对照组为PMN的PBS悬浮液。培养20、40、60min后定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其白细胞介素-6(IL-6)的分泌水平；另外在培养6、12 h后使用流式细胞分析仪检测各组PMN的凋亡率。结果糖尿病患者的PMN无论是否受到A.actinomycetem超声滤液刺激，在实验各个时段的IL-6分泌水平均高于非糖尿病者，且细胞凋亡率明显降低(P1 材料和方法

    1.1 主要试剂和仪器

    伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans，A.actinomycetem)Y4(b型；上海市口腔研究所)，Percoll淋巴细胞分离液(GE Healthcare公司，瑞典)，人IL-6酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immune sorbent assay，ELISA)检测试剂盒(武汉博士德有限公司)，Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(凯基生物有限公司)，超净工作台(浙江赛因科学仪器有限公司)，倒置显微镜(Nikon公司，日本)，超声波粉碎机(上海金鹏分析仪器有限公司)，流式细胞分析仪(Becton Dickinson公司，美国)，高速低温离心机(Hemeus公司，德国)，酶标仪(上海精密仪器仪表)。

    1.2 研究对象

    选取患有2型糖尿病和非糖尿病患者各4例，年龄38～55岁，均知情同意。糖尿病患者均符合以下条件：2型糖尿病诊断1年以上；糖化血红蛋白>8%；全身状况好；近期糖尿病状况及用药无明显变化；不吸烟。非糖尿病者要求全身健康，无系统性疾病，无吸烟史。2组均要求牙周状况良好 ......