康宏 李振强 闭艳妲

    (兰州大学 口腔医学研究所，兰州 730000)

    自组装山羊颞下颌关节盘组织工程纤维软骨模型的构建

    康宏 李振强 闭艳妲

    (兰州大学 口腔医学研究所，兰州 730000)

    目的 构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型，观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征，为颞下颌关节盘及其他组织工程纤维软骨的进一步研究创造条件。方法 分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞，按每井5.5×106个接种到预制的直径5mm×深10mm琼脂糖井内，每天换液，培养2周，观察和检测颞下颌关节盘形态和成分的变化。结果 接种后1 d，山羊颞下颌关节盘细胞在琼脂糖井内聚集，开始自组装成一圆盘状基体，后来逐渐变成圆球形。培养2周时，苏木精-伊红染色可观察到纤维软骨细胞呈圆形，周围有基质包绕；Safranin-O/fast green染色显示自组装基体内纤维软骨细胞分泌细胞外基质氨基多糖；picro-sirius red染色可见自组装基体内有大量胶原纤维。Ⅰ型胶原免疫组织化学染色可见胞浆和细胞外有棕黄色颗粒，表明自组装纤维软骨可以产生与自然关节盘组织一致的Ⅰ型胶原成分。结论 利用琼脂糖井构建的山羊颞下颌关节盘自组装组织工程模型，能产生与自然关节盘成分相似的细胞外基质，表明组织工程化颞下颌关节盘组织的途径是可行的。

    颞下颌关节盘； 组织工程； 纤维软骨

    颞下颌关节盘是位于下颌髁突和颞骨关节窝之间的纤维软骨样组织，是颞下颌关节(temporomandibular joint，TMJ)行使功能的主要组成部分，以关节盘变薄、透明样变和穿孔等不可逆性病变为特征的严重颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorder，TMD)，给患者的进食、说话带来了困难和痛苦，长期以来没有很好的治疗方法，是目前口腔临床面临的疑难问题之一。近年来组织工程技术的发展为临床修复损伤和病变的关节盘提供了一种新的治疗方向[1]。

    颞下颌关节盘组织工程的目标是在体外组装出与自然组织相似的复合基体，以实现病损关节盘的功能替换[2]。以往的组织工程纤维软骨研究模型大多利用三维支架构建[2-6]，虽然支架材料不断改进，但是仍然存在一些不足，比如抑制细胞的移动和细胞之间的信息交流、应力遮挡作用阻碍细胞的机械信号转导、支架阻碍细胞生长和细胞外基质重塑、有些固体支架使细胞表型丧失、支架的不利降解产物及炎症反应等等，以琼脂糖为模具的自组装技术(selfassembly process)因可以克服上述缺点在关节软骨组织工程的研究中已有成功报道[7-9] ......