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编号:446306
金属栅栏式腭器官培养模型的建立
http://www.100md.com 2011年7月17日 华西口腔医学杂志 2011年第4期
腭裂,充质,1材料和方法,1实验动物,2实验试剂,3金属支架的制备,4胚胎的获取以及腭器官的解剖分离,5苏木精-伊红染色以及光镜观察,2结果,3讨论
     卢胜军 何苇 石冰 蒙田 李承浩 封兴华

    (1.第四军医大学口腔医院 颌面外科,西安 710032;2.口腔疾病研究国家重点实验室,四川大学,成都 610041)

    腭器官体外培养是研究腭裂发病机制的一条重要途径,相比单一的腭胚突上皮细胞或腭间充质细胞的培养,它避免了单一细胞培养的缺陷,可从立体结构上研究腭的发生、发展以及调控机制,而且其排除了体内实验的复杂环境以及诸多干扰因素,成为目前研究腭裂发病机制的重要手段。

    与细胞培养相比,腭器官培养需要消耗大量氧气,因而腭器官不能完全浸没在液体里面。本实验采用妊娠14 d的孕鼠,获取胚胎,解剖腭器官,采用金属隔栅式培养法,观察腭器官在体外的发育过程,以期为研究腭裂发病机制提供了一个良好模型。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    20只成年C57BL/6J小鼠购自四川大学华西实验动物中心,SPF饲养,室温控制在20~25℃,充足食物,自由饮水。按雌雄比例2∶1交配,次日发现有阴道栓者定为妊娠0 d。

    1.2 实验试剂

    DMEM/F12培养基和胎牛血清FBS(Hyclone公司 ......

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