张利平 王爽 周向葛 徐屹，3

    (1.口腔疾病研究国家重点实验室，四川大学，成都 610041；2.四川大学 化学学院，成都 610064；3.四川大学华西口腔医院 牙周科，成都 610041)

    牙菌斑生物膜是牙周病的始动因子，其主要由细胞外基质和嵌入其中的细菌组成，是细菌赖以生存和进行信号交流的场所。群体感应(quorum sensing，QS)是细菌间进行信号传递的一种机制。细菌可产生自体诱导分子(autoinducer，AI)，通过感知其浓度来调控周围环境中细菌数量的变化。随细菌密度的增加，AI的浓度不断增加，达到一定阈值时，可以启动细菌相关基因的表达，调控细菌生物发光、毒力因子、生物膜形成等行为[1-2]。AI-1能调控菌种内群体感应现象[3]；AI-2即呋喃酰硼酸二酯，为菌种间信号分子，它可感知菌种间细菌数量，从而调控自身行为[4-5]。牙龈卟啉单胞菌在牙周炎中的检出率最高，是龈下菌斑中生物膜的主要组成部分，被认为是牙周炎的主要可疑致病菌。Frias等[6]研究发现牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌、中间普雷沃菌等均产生AI-2。

    干扰细菌QS通路可以控制细菌相关生物学行为。群体感应抑制剂(quorum sensing inhibitor，QSI)的研究有助于控制细菌感染。溴化呋喃酮是一种QS通路抑制剂，它可以与细菌分泌的自诱导物竞争性结合自诱导物受体，通过作用于细菌的群体感应系统影响细菌生物膜的形成[7-8]。其对自诱导物AI-1、AI-2均有抑制作用[9-10]。Wu等[9]证实溴化呋喃酮能够通过抑制自诱导物AI-1来抑制绿脓杆菌的群体感应系统，加速清除小鼠肺部感染的绿脓杆菌，缓解病情。Defoirdt等[10]证实溴化呋喃酮还可干扰AI-2介导的群体感应系统。本研究旨在通过光密度值测定和扫描电镜观察，探讨溴化呋喃酮[5Z-4-溴-5溴亚甲基-2(5H)呋喃酮]在体外对牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌生物膜形成和结构的影响。

    1 材料和方法

    1.1 实验菌株和培养基

    牙龈卟啉单胞菌ATCC33277由四川大学口腔疾病研究国家重点实验室提供。液体培养基牛心脑浸液(brain heart infusion，BHI)培养基、固体培养基牛心脑浸汁琼脂培养基(Oxiod公司，英国)。

    1.2 主要试剂和仪器

    溴化呋喃酮由四川大学化学学院合成、鉴定并提供。该化合物溶解于无水乙醇，-20℃保存。

    超净工作台(苏州净化设备有限公司) ......