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编号:446271
口腔白色假丝酵母菌毒力因子与随机扩增多态性DNA条带的多元回归分析
http://www.100md.com 2011年1月20日 华西口腔医学杂志 2011年第6期
磷脂酶,1材料和方法,1试验菌株,2白色假丝酵母菌细胞外磷脂酶活性的测定2,3白色假丝酵母菌分泌性蛋白酶活性的测定3,4白色假丝酵母菌黏附力的测定4,5白色假丝酵母菌芽管生成率的测定5,6RA
     刘奇 武有聪 袁有华 白丽 牛坤

    口腔白色假丝酵母菌毒力因子与随机扩增多态性DNA条带的多元回归分析

    刘奇1武有聪1袁有华1白丽1牛坤2

    (1.大理学院基础医学院 医学微生物学及免疫学教研室;2.大理学院 研究生处,大理 671000)

    目的 探讨白色假丝酵母菌毒力因子与随机扩增多态性DNA(RAPD)电泳条带之间的关系,构建多元回归模型。方法 采用体外法对92株白色假丝酵母菌的细胞外磷脂酶活性、分泌性蛋白酶活性、芽管生成率、对口腔黏膜细胞的黏附力进行检测;并通过RAPD方法进行扩增,电泳后分析扩增条带。对上述毒力因子和电泳条带进行多元回归分析。结果 白色假丝酵母菌的细胞外磷脂酶活性与RAPD扩增后350、450、650和1300 bp 4个条带明显相关(P<0.05);分泌性蛋白酶活性与350、1 200 bp 2个条带明显相关(P<0.05);芽管生成率与400、550 bp 2个条带明显相关(P<0.05)。结论 白色假丝酵母菌RAPD部分电泳条带与部分毒力因子的强弱有关,其所含基因信息可能参与该菌毒力因子的调节。

    白色假丝酵母菌; 毒力; 随机扩增多态性DNA; 多元回归

    白色假丝酵母菌(Saccharomyces albicans)是目前深部真菌感染中最常见、最主要的病原体之一,该菌深部感染的病死率为68.90%[1]。快速准确地判断白色假丝酵母菌的毒力,不仅为该病的诊断、治疗和预防提供依据,而且对该病的流行病学调查亦有重要的意义。本实验对92株白色假丝酵母菌的细胞外磷脂酶、分泌性蛋白酶、芽管生成能力、对口腔黏膜细胞的黏附力进行测定,采用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)技术扩增并电泳,进行多元回归分析,并构建回归模型,以探索白色假丝酵母菌各毒力因子与各RAPD电泳条带之间可能存在的关系。

    1 材料和方法

    1.1 试验菌株

    试验菌株均为分离自云南大理地区的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)阳性人群和健康携带人群的口腔假丝酵母菌。健康携带人群排除HIV阳性者、肿瘤患者、免疫缺陷病患者、器官移植患者、妊娠者、长期接受治疗者和口腔疾病患者。菌株经形态染色、培养特性鉴定、芽管形成实验、假菌丝及厚膜孢子形成实验、YBC(yeast biochemistry card)酵母鉴定卡及CHROMagar培养基培养综合鉴定,确定为白色假丝酵母菌 ......

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