周文娟 柳忠豪 许胜 郝鹏杰 许丰伟 孙爱杰 卢志山

    (1.烟台市口腔医院 种植中心；2.滨州医学院 口腔学院，烟台 264008)

    口腔种植学现已成为当今口腔医学领域中发展最快、影响力最大的一个分支，种植义齿已被越来越多的牙医和缺牙患者所接受。1977年Br?nemark等[1]提出种植体“骨结合”的概念，并将其作为种植成功的评价标准。种植体周围的骨吸收是影响种植体长期稳定性和成功率的主要因素。近来发现的破骨细胞核因子κB受体活化因子配基(receptor activator nuclear factor kappa B ligand，RANKL)及其伪受体骨保护因子(osteoprotegerin，OPG)属于新的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)配体和受体家族成员，是细胞外调节骨吸收的关键因子，在骨吸收复杂的调控网络中处于中心地位。初步研究认为RANKL和OPG可能在种植体周围的骨吸收中起着重要作用[2-3]。为进一步了解RANKL和OPG在种植体周围牙槽骨改建中可能发挥的作用，本研究采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)法和免疫组化染色，探讨RANKL和OPG在非负荷期种植体周围软组织和骨组织中的表达变化和时间分布特点。

    1 材料和方法

    1.1 建模和分组

    选取购自山东省天然药物工程技术研究中心的雄性健康成年Beagle犬6只，1～2岁龄，体重10.85～12.30 kg，适应性喂养1周。选取Beagle犬的下颌左右第二前磨牙和第四前磨牙共计24个牙位，按照完全随机化的原则将牙位分为2组，即实验组(12个牙位)和对照组(采用对侧同名牙齿，12个牙位)。对照组和实验组分别于实验当天、第30、60、75、83、87天6个时间点随机完整拔除各2颗前磨牙。实验组在对照组拔牙的同时，拔除动物对照组的对侧同名牙齿，每个拔牙创选取2个牙槽窝常规预备种植窝，参照文献[4]在犬左侧下颌各拔牙位点即刻植入ITI螺纹柱形纯钛种植体，各时间段分别植入种植体4颗，共计24颗。本实验在建模过程中采用了时间上的倒叙，即将6只Beagle犬在同一时间处死，在实验第90天，分别取种植体植入后3、7、15、30、60、90 d共6个时间点分别处死动物并制取标本。对实验组种植体周围和对照组拔牙创周围约2mm的软组织进行实时荧光定量PCR检测。同期处死动物，取下颌骨进行大体标本观察，拍摄X线片，取种植体周围约5mm的骨组织行免疫组化检测 ......