牙龈卟啉单胞菌PG0839基因突变株的构建(4)
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参见附件。
厌氧培养7 d后,实验组可见白色、光滑的阳性
菌落生长;对照组1未见细菌生长,不仅表明P.gingi-valis W83菌株不具有红霉素抗性,而且证实红霉素在细菌培养基中有效;对照组2可见产黑色素圆形菌落生长,符合P.gingivalis菌落形态特征,为P.gingi-valis W83菌株。
2.4 突变株PCR检测结果
2.4.1 P.gingivalis的检测结果 PG0839基因突变菌株16S rRNA特异性引物PCR扩增产物电泳图如图6所示。产物片段长度为197 bp。结果可见PG0839基因突变菌株为P.gingivalis。
2.4.2 erm基因的检测结果 PG0839基因突变菌株erm基因引物PCR扩增电泳图如图7所示。产物片段长度为2 101 bp。结果可见PG0839基因突变菌株基因组DNA中存在erm基因片段。
2.4.3 PG0839基因的检测结果 PG0839基因突变菌株PG0839基因引物PCR扩增产物电泳图如图8所示。P.gingivalis W83菌株的PG0839产物为1 584 bp,而PG0839基因突变菌株的PG0839产物为3 685 bp。结果可见:PG0839基因突变菌株基因组DNA中存在PG0839基因片段,但是该片段中插入了2 101 bp的erm基因片段。
2.4.4 反转录PCR检测结果 PG0839基因突变菌株PG0839基因引物反转录PCR扩增电泳图如图9所示 ......
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