色素与唾液相互作用的吸附动力学研究(2)
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1 材料和方法
1.1 实验仪器及试剂
SR7000DC型SPR仪(Reichert公司,美国)、Bio-fuge Fresco型低温离心机(Heraeus公司,德国)、Mil-lipore Direct-Q3超纯水器(Millipore公司,法国)。高纯度的TF、Cur和Cy,二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(日本西宝生物科技有限公司)。11-巯基十一烷酸(11-mercaptoundecanoic acid,11-MUA),1、3-二甲基氨基丙基-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochlo-ride,EDC],N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccini-mide,NHS),牛血清白蛋白,缓冲液(phosphate buf-fer solution,PBST);上述试剂均为美国Sigma公司产品。
1.2 实验方法
1.2.1 WS的收集和蛋白质量浓度的测定 收集WS的具体步骤详见参考文献[3]。收集完成后采用Bradford
法测定WS蛋白的质量浓度,测定步骤详见参考文
献[4]。
1.2.2 自组装WS膜 SPR芯片置于60 ℃的10 mmol·L-1 11-MUA/纯乙醇溶液中24 h,取出后用纯乙醇冲洗,氮气吹干。通入1 mL的体积比为1∶1的0 ......
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