新型多孔磷酸钙支架对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响(3)
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参见附件。
15 min，弃上清液后PBS冲洗3次，每次5 min，弃上清液后加入氯化十六烷基吡啶室温下孵育30 min，吸上清液，定样本的OD值(波长562 nm)。测定时用氯
化十六烷基吡啶溶液调零，并同时测一组未加ARS的单纯细胞的上清液OD值。样本OD值=样本OD测定值-单纯细胞上清液OD值。每个样本重复3次取平均值。
1.5 数据处理与统计学分析方法
采用SPSS 17.0软件对检测结果进行方差分析，检验水准为双侧α=0.05。
2 结果
2.1 IPCM观察
初次换液可见BMSCs呈圆形半透明状，贴壁生长、增殖并形成散在克隆。BMSCs逐日增殖，约10 d后接近铺满培养皿底部，此时可进行首次传代。换用诱导型DMEM培养后，细胞慢慢向梭形或多边形转化，偶有突起，形态类似成骨细胞。接种于不同材料上的细胞均可在材料表面黏附并生长，共同培养72 h后形态如下：CPC组BMSCs较为伸展，形态与单纯培养组细胞相似；PLGA组BMSCs多为球形，生长状态较差；TCP组BMSCs形态介于上述两者之间，更接近于CPC组；散落在24孔板底壁细胞的生长形态与单纯培养组细胞的镜下形态相似(图1)。
2.2 生长曲线测定
BMSCs接种于支架材料上后，部分黏附于材料上开始生长、增殖，部分漏出在培养板底壁继续生长。细胞的生长曲线见图2：黏附于材料上的细胞数量随着时间的增加而增加，呈时间依赖性，7 d后进入平台期，其后增长趋势减慢；CPC组细胞数量最多，其次是TCP组，但两者之间的差异无统计学意义(P>0.05)；PLGA组细胞数量最少，与其他两组的差异有统计学意义(P<0 ......
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