近红外荧光量子点表皮生长因子受体单克隆抗体探针对头颈部鳞状细胞癌活体可视化成像和体内分布的动物实验研究(2)
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参见附件。
1.2.2 QD800-EGFR mAb探针体外标记BcaCD885活细胞 将生长良好的BcaCD885细胞以每毫升5×104个的浓度接种到9个35 mm玻璃底培养皿(直径为15 mm)中,每个1 mL,培养24 h后,弃去培养基,PBS清洗3次。然后分为3组,每组3个培养皿。实验组加入浓度为100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探针100 μL;对照组Ⅰ加入100 μL浓度为100 nmol·L-1的QD800;对照组Ⅱ先加入浓度为1 μg·mL-1的EGFR mAb 200 μL以封闭EGFR,2 h后用PBS清洗3次,然后加入浓度为100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探针100 μL。以上各组在37 ℃下孵育30 min后用PBS冲洗3次,然后在LSCM下观察QD800-EGFR mAb探针标记BcaCD885细胞的情况。
1.2.3 裸鼠头颈鳞状细胞癌模型的建立 取对数生长期的BcaCD885细胞,采用0.5%胰蛋白酶进行消化,在4 ℃下,800 r·min-1离心4 min,然后将BcaCD885细胞悬于PBS液中,将含有2×106个BcaCD885细胞的PBS悬液0.2 mL注射于12只裸鼠的颏-颈交界部皮下,从而建立了头颈部鳞状细胞癌模型,每日观察肿瘤的生长情况,待肿瘤的最大径达到0.8~1.0 cm时开始实验。
1.2.4 肿瘤活体可视化成像观察 将头颈部鳞状细胞癌模型裸鼠分为实验组和对照组,每组6只,用2%戊巴比妥钠(40 mg·kg-1)行腹腔注射麻醉后 ......
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