趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移中的作用(2)
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1.2.3 Western blot分析 将同样大小口腔鳞状细胞癌组织及正常口腔黏膜组织匀浆，以细胞裂解液将组织匀浆及细胞裂解，参照文献[9]的方法提取蛋白质。取80 μg蛋白质样品进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis，SDS-PAGE)，转膜，室温封闭
1 h后，加入含0.05% Tween 20的TBS缓冲液稀释的CXCR4兔抗人单克隆抗体，4 ℃孵育过夜，TBS缓冲液漂洗3次后，加入相应的辣根过氧化物酶标记的二抗(1∶1 000)，37 ℃温育1 h，增强化学发光系统显色。利用投射仪图像分析系统扫描确定X线片上杂交条带的光密度值。实验独立重复3次，以3次实验所得光密度值的平均数表示蛋白质的含量。
1.2.4 MTT法测定细胞增殖 收集Tca8113细胞，加入96孔板(每100 μL含1×104个细胞)。实验设置4组：1组为对照组，Tca8113细胞加RPMI1640培养液；2组为CXCL12刺激组，Tca8113细胞加RPMI1640培
养液、100 ng·mL-1 CXCL12；3组为CXCL12中和组 ......
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