不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定(3)
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参见附件。
3 讨论
根据世界卫生组织关于龋病流行严重程度的标准[8],并参考其他文献[9],本研究将DMFT指数≥6者确定为高龋患者,DMFT=0者确定为无龋健康人。
本研究采用的研究样本为牙菌斑,取样位点为受试者口腔内无龋损的釉质光滑面。研究[10]表明:牙
菌斑和唾液样本是良好的口腔变异链球菌研究对象。本研究的目的是为了获得确实可靠的变异链球菌临床分离株,且龋病形成的先决条件是牙菌斑的形成,所以采用牙菌斑作为研究样本。研究[11-12]发现:变异
链球菌的定植存在部位差异性,完整的牙齿表面和龋坏牙面以及牙冠不同部位,变异链球菌的数量和比例都是不同的。为了避免因部位因素而影响菌斑中变异链球菌检出情况,本研究的取样位点均为无龋损的釉质光滑面。
口腔中的菌群数量多、种类复杂,为了能够从牙菌斑中获得变异链球菌的纯培养物,本研究采用具有选择及鉴定功能的培养基进行细菌的分离与培养。研究[1]表明,变异链球菌和表兄链球菌(Strepto-coccus sobrinus,又称远缘链球菌或茸毛链球菌)是人类最主要的致龋菌,是具有相似表型特征而遗传型和分子组成不同的异源性细菌。虽然变异链球菌在人类口腔中的检出率最高,可达90%以上,但表兄链球菌的检出率也可达10%~76%,因此,本研究中细菌培养的重点在于区分上述两种细菌。研究[2]证实,TYCSB培养基在变异链球菌培养方面与其他选择性培养基比较具有高灵敏性、高特异性及保存时间相对较长的特点,并且通过菌落形态的差异可以区分出变异链球菌与表兄链球菌。本研究在细菌初代培养时采用TYCSB培养基,发现两种典型的菌落形态,一种为较小的边界清楚的白色菌落,另一种为边界模糊的黄白色菌落 ......
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