采用RNA干扰技术沉默survivin基因对口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的影响(2)
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参见附件。
1.7 统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件,进行单因素方差分析及两个独立样本的t检验,检验水准为双侧α=0.05。
2 结果
2.1 细胞转染
细胞转染结果见图1:转染红色荧光标记的siRNA 6 h后,荧光显微镜下观察,80%的细胞都发红色荧光,说明多数细胞都已经转染了survivin siRNA。
2.2 半定量RT-PCR检测细胞中survivin mRNA的表
达情况
半定量RT-PCR检测细胞中survivin mRNA的电泳结果见图2,空白对照组、阴性对照组和实验组的相对表达量分别为0.65、0.64和0.05。实验组转染siRNA后,survivin mRNA的相对表达量明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),干扰效率高达92.2%±1.53%。
A:空白对照组;B:阴性对照组;C:实验组。
2.3 MTT法检测细胞生长活性
MTT法测定结果见图3。
阴性对照组与空白对照组相比,转染后48 h细胞生长未受影响,而实验组细胞生长受到明显抑制(图3),细胞活性下降至47.16%±3.19%。
2.4 细胞凋亡检测结果
tunnel分析结果见图4:与阴性对照组和空白对照组比较,实验组转染siRNA后,细胞中出现很多绿色亮点,表明有大量的细胞凋亡。实验组、阴性对照组和空白对照组的细胞凋亡率分别为24 ......
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