海藻酸钙—纳米羟磷灰石骨修复材料的制备及部分生物相容性测定(3)
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参见附件。
1.3.6 溶血试验 溶血试验参照《ISO10993-4:2002医疗器械生物学评价第4部分:与血液相互作用试验选择》设计实验。采集犬血2 mL与1 mL肝素混匀,加入2.5 mL生理盐水稀释备用。实验分为浸提液组、生理盐水组(阴性对照组)、双蒸水组(阳性对照组)。每组5个平行样本,每个样本5 mL,每个样本中加入0.1 mL备用血,37 ℃孵育1 h后2 500 r·min-1离心5 min,观察样本外观。取上清液,分光光度计545 nm下检测OD值,按公式计算溶血率:溶血率=(OD浸提液组-OD阴性对照组)/(OD阳性对照组-OD阴性对照组)×100%,溶血率<5%符合要求,大于5%提示材料有溶血作用。
1.4 统计学分析
采用SPSS 13.0统计软件对实验数据进行处理,组间比较采用两样本t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 材料的形貌及孔隙率
SEM扫描结果显示材料具有多孔性,孔径和孔形态不一,且孔与孔之间有一定的贯通性,孔隙率高达(88.6±4.5)%,孔的存在有利于细胞的生长及引导新骨长入。材料无明显的无机颗粒团聚现象,仅在孔壁见少量的nHA附着(图1)。
图 1 复合材料的观察结果 SEM × 2 000
Fig 1 Observation of CM SEM × 2 000
2.2 材料结晶度分析
ALG、CM及nHA的XRD图谱见图2。由图2可见,ALG没有尖锐狭窄的晶体峰,峰都较宽,意味着ALG的低结晶特征。CM的衍射图中出现了HA的特征峰,分别在2θ=25.7°、31.7°、32.9°和34.0°处。但与nHA衍射谱相比,各个峰较弥散,强度较弱,表明nHA结晶度变低或晶体体积减小 ......
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