木糖醇对黏性放线菌生长及产酸影响的体外研究(2)
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1 材料和方法
1.1 实验菌株、仪器及培养基制备
1.1.1 实验菌株 黏性放线菌ATCC 15987由四川大学口腔疾病研究国家重点实验室提供。
1.1.2 实验仪器 厌氧培养箱(浙江义乌冷冻机总厂)，METTLER TOLEDO FE20型pH计(Mettler Toledo公司，瑞士)，电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，TDL-40B型低频离心机(上海安亭科学仪器厂)，BHC-1300ⅡA/B3型生物洁净安全柜(苏州净化设备有限公司)，AUTOCLAVE MLS-3780型高压灭菌机(Sanyo公司，日本)，SP-ECTRONIC 200分光光度仪(Thermo Scientific公司，美国)。
1.1.3 木糖醇-BHI液体培养基配制 在脑心浸液(brain heart infusion，BHI)液体培养基中分别加入木糖醇粉末，调整其质量浓度为128 g·L-1，用NaOH溶液和HCl溶液调节pH值至7.40。配置200 mL上述木糖醇-
BHI液体培养基，另配置200 mL纯BHI液体培养基，调节pH值至7.40，立即置于121 ℃、133 MPa条件下消毒2 h，备用。
1.2 实验方法
1.2.1 实验菌株的复苏以及培养 黏性放线菌ATCC 15987冻干菌株复苏48 h后，采用平板划线法将其接种于BHI琼脂培养基中，37 ℃厌氧条件(80% N2、10% H2、10% CO2)下培养48 h，挑取单菌落经形态学及生化鉴定为纯培养物后，将菌落接种于BHI液体培养基中，厌氧培养48 h，将菌液在4 ℃下以
4 000 r·min-1离心5 min，PBS(pH=7.40)缓冲液洗菌2次，用比浊仪在BHI液体培养基中调整菌悬液密度至0 ......
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