参与不同牙本质粘接界面退变过程中基质金属蛋白酶种类的研究(2)
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参见附件。
1.4.2 MMPs含量检测 每组试件包括6个样本,每个样本称取0.2 g牙本质粉,用1 mL 0.5 mol·L-1 pH=6.4的乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)溶液4 ℃脱矿24 h,离心以后弃掉上清液
(3 000 r·min-1离心2 min,4 ℃),双蒸水冲洗离心3次(3 000 r·min-1离心2 min,4 ℃),丙酮冲洗离心1次(14 000 r·min-1离心10 min,4 ℃)。各组样品在1 mL蛋白质提取液中4 ℃浸泡24 h,离心以后(14 000 r·min-1离心10 min,4 ℃)提取上层液体,备用。利用Fluorokine? MAP多元试剂盒及MMP-1、-2、-3、-8、-9抗体,按说明书的操作方法测定各样本5种MMPs含量(每组样本重复测量3次),结合BCA蛋白定量结果计算各组MMPs终浓度。按照公式ΔX6-0=(X6-X0)/X0×100%,计算浸泡老化6个月后各组MMPs的消耗量百分比,X6为老化6个月后各组每种MMPs含量测量值,X0为老化前各组每种MMPs含量平均值。
1.5 数据处理及统计分析
采用SPSS 18.0统计软件对实验结果进行统计学分析。对微剪切粘接强度进行双因素方差分析(影响因素:老化时间、粘接剂种类),选择Tukey检验进行组间两两比较,随后对各组粘接试件的断裂模式进行卡方检验。选用独立样本T检验对各处理组每种MMPs含量的消耗量百分比进行组间比较,显著水平为α=0.05。
2 结果
2.1 微剪切粘接强度结果
人工唾液老化前Single Bond 2和Clearfil S3 Bond组的微剪切粘接强度分别为(54 ......
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