重组腺病毒Ad—APN—EGFP的构建与促进种植体周围成骨(4)
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参见附件。
既然APN影响成骨破骨平衡，而成骨破骨平衡又在种植体周围骨再生中起着至关重要的作用，APN就有可能作为干预因素在种植体周围骨再生中起到调节作用。基于这一考虑，本课题组设计了以Matri-gel为载体的APN蛋白缓释系统，其缓慢释放的APN可以抑制兔成熟破骨细胞的骨吸收功能，还可以促进RAW264.7细胞的凋亡，抑制OVX动物体内破骨细胞活性，促进多孔HA周围骨再生[7]。然而，本课题组的进一步实验发现，Matrigel作为缓释载体，对于光滑表面的种植体并不适用。本课题组同时也用病毒载体携带Satb2以促进种植体周围骨再生，并取得成功[8]。
由于目前国内外尚无病毒载体携带APN基因影响种植体周围骨再生的实验报道，因此本实验设计用腺病毒携带APN基因。腺病毒具有携带目的基因的众多优点。本实验中构建的Ad-APN-EGFP经PCR电泳、Real-Time PCR、荧光显微镜观察重组腺病毒转染效率、转染是否成功、转染后目的基因的表达等，证实了实验构建的目的基因载体的有效性，进一步实验将在蛋白水平进一步验证。体内实验结果初步提示Ad-APN-EGFP确实能够促进种植体周围骨再生，既然APN对成骨细胞、破骨细胞、骨髓基质细胞或BMSCs都存在作用，这种促进效果的机理是上述某种原因还是多种原因的总结果值得进一步研究 ......
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