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编号:643464
4-硝基喹啉-1-氧化物诱导C57BL/6小鼠舌黏膜癌变的研究
http://www.100md.com 2015年3月24日 华西口腔医学杂志 2015年第4期
口腔癌,1材料和方法,1实验动物,2实验试剂及设备,3方法,4统计学分析,2结果,1大体观察,2口腔黏膜,3组织病理学,3讨论
     代晓明 刘华 左志斌 秦少华 阮永华 李逸松

    1.昆明医科大学第一附属医院整形外科颌面组,昆明 650032;2.云南省第二人民医院口腔颌面外科,昆明 650021;3.昆明医科大学基础医学院病理教研室,昆明 650500

    口腔鳞状细胞癌(以下简称口腔癌)是人类最常见的恶性肿瘤之一,在我国舌癌居口腔癌的首位[1-4]。缺乏早期特异性诊断标志物以及有效的治疗靶点是舌癌患者临床治疗效果不佳的主要原因[5]。获得理想的舌癌动物模型是解决上述问题的关键。二甲基苯并蒽(9,10-Dimethyl-benzanthrancene,DMBA)诱导金黄地鼠(Syrian hamster)口腔癌模型在20世纪50年代已有报道[6]。4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4NQO)诱导大鼠黏膜癌变被认为是更加理想的口腔癌动物模型[7]。本课题组拟对4NQO诱导C57BL/6小鼠舌黏膜癌变的规律和特点进行研究,为后续舌癌的发病机制研究及找寻新防治靶点提供可靠的动物模型。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    85只雌性C57BL/6小鼠,SPF级,体质量为18~20 g,鼠龄30~50 d,购自广东省医学实验动物中心。

    1.2 实验试剂及设备

    4NQO(Sigma公司,美国),用1,2丙二醇配置成500 mg·L-1,避光保存于4 ℃冰箱备用。1,2丙二醇分析纯(西陇化工股份有限公司),光学显微镜(Nikon公司,日本),生物组织脱水机(TS-12J型,孝感市宏业医用仪器有限公司),生物组织包埋机(BM-VI型,孝感电子仪器厂),组织切片机(Leica2235型,Leica公司,德国),图片采集系统(BX-51型显微镜,奥林巴斯公司,日本)。

    1.3 方法

    1.3.1 实验分组 将85只C57BL/6小鼠分为3组:蒸馏水对照组(n=5),1,2丙二醇对照组(n=5),实验组(n=75)。75只实验组小鼠再随机分为15笼,每笼5只,并对每笼进行标记,即第0周对应第1笼,第2周对应第2笼,第4周对应第3笼,以此类推,第28周对应第15笼。实验开始时(第0周,W=0)处死实验组第1笼小鼠,之后每2周处死1笼实验组小鼠,直至28周。其余2个对照组小鼠于28周处死 ......

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