袁雯雯 王晓茜 张杰华 周闻捷 冯云 陈娇 张平

    口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院(四川大学)，成都 610041

    牙周病是一种全球流行的多种致病微生物引起的口腔疾病，可以影响到全世界90%的人口[1]。其中较为常见的慢性牙周炎是由位于龈下菌斑的革兰阴性致病菌启动和发展的，最终导致结缔组织的附着丧失、牙槽骨的吸收及成人牙齿的丧失。此外，还与牙周病和一些威胁生命的系统性疾病的发生呈正相关，如动脉粥样硬化以及糖尿病等[2-3]。

    程序性死亡分子1(programmed death 1，PD-1)是B7基因家族的一员，是T细胞活化过程中的负性调节分子[4]。程序性死亡配体1(programmed death ligand 1，PD-L1)是PD-1的配体，文献[5]报道PD-L1诱导性表达于体内多种细胞，包括抗原提呈细胞(antigen presenting cells，APCs)、γ-干扰素(in-terferon-γ，IFN-γ)诱导的人外周血单个核细胞、激活的树突细胞等。还有文献[6]称PD-L1广泛表达于各种肿瘤细胞表面，如乳腺癌、卵巢癌、口腔癌等。PD-1/PD-L1是一对重要的负性协同刺激分子[4]，PD-1与PD-L1结合后会抑制T细胞受体介导的淋巴细胞增殖和细胞因子的分泌[5]，从而在免疫调控中发挥负性调节作用。PD-1/PD-Ls途径对维持外周免疫耐受有重要作用。此外，PD-1/PD-Ls和T细胞介导的多种疾病相关，如自身免疫性疾病、肿瘤免疫等[7-8]。

    PD-L1与慢性炎症的关系目前还不清楚。本课题旨在探讨慢性牙周炎组织细胞表面PD-L1的表达与牙周炎症程度的相关性，为阐明慢性牙周炎免疫调控机制，建立慢性牙周炎的实验诊断、临床预防和治疗新方法奠定基础。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂和仪器

    兔抗人PD-L1抗体(Abcam公司，美国)，Immobilon Western化学发光HRP底物(Millipore公司，美国)，Trizol(Invitrogen公司，美国)，TaKaRa逆转录试剂盒(TaKaRa公司，日本)，QuantiTect-SYBR Green PCR试剂盒(Qiagen公司，美国)，HRP山羊抗兔IgG抗体、山羊抗兔IgG免疫组化试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)，十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis ......