陈沐 刘学 余东升 王成 王伟财 黄洪章

    1.广东医学院附属南山医院口腔科，深圳 518052；2.中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院口腔颌面外科，中山大学口腔医学研究所，广州 510055

    先天性唇腭裂是一类常见的口腔颌面部缺陷，占所有先天性畸形的65%左右。目前我国非综合征性唇腭裂的发病率为0.762‰，其中非综合征性腭裂的发病率为0.2‰[1]；中国出生缺陷监测网数据显示，腭裂年度发病率呈上升趋势[2]；因此腭裂是目前出生缺陷研究中的焦点问题之一[3-4]。已有研究[5]表明，妊娠期摄入致畸物可能导致新生儿腭裂的发生。在致畸物的研究中，维生素A族与唇腭裂发病的关系一直受到唇腭裂病因研究学者的高度关注[6]。全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，atRA)是维生素A在体内的代谢中间产物及发挥功能的主要形式，参与调节早期胚胎细胞的定向分化，在胚胎发生、发育中起重要作用[7]。在哺乳动物胚胎发育过程中，过多摄入维甲酸可导致神经管、心脏和颜面部等多种畸形的发生，形成唇腭裂、面中部发育不良、颅中缝早闭等一系列的颌面部骨骼发育畸形，但其作用机制目前仍未十分明确[8-9]。

    有学者[10-11]认为，上颌骨的生长发育障碍是腭裂畸形本身内在的发育缺陷所致。根据国内外的研究[12-15]可以发现，腭裂可因胚胎发育时期的胚胎细胞外基质及细胞的分化、移动、增殖受到干扰而引起；一些致畸剂通过阻断某些基因的表达或干扰某些物质(如表皮生长因子受体、转化生长因子β3等)的合成而影响胚胎细胞的分化移动。当裂隙形成后，这些内源性因素就成为影响上颌骨发育的主要原因。研究[16]指出，骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)信号通路在唇及腭部的发育中起着非常重要的调节作用，然而BMP信号通路在atRA诱导过程中的表达模式及其对小鼠腭突生长发育影响的调控作用目前尚不清楚。本实验采用孕鼠妊娠第10天时atRA灌胃的方法，用免疫组织化学及逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)技术检测BMP信号通路关键因子骨形态发生蛋白受体(bone morphogenetic protein receptor，BMPR)2的时空表达，为后期研究维甲酸对腭部间充质细胞成骨分化进程的影响建立理论及实验基础。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    无特定病原体(spece fi c pathogen free ......