庞骁霄 李丽 马利 郑谦 李承浩

    口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院唇腭裂外科(四川大学)，成都 610041

    非综合征型唇腭裂是颌面部最常见的先天性发育畸形，其病因复杂，目前认为与基因和环境因素有关。环境因素中如糖皮质激素类、四氯二苯对二恶英等均可诱发先天性腭裂。地塞米松(dexamethasone，DEX)作为糖皮质激素家族中的一员，具有较高的致畸风险，但具体致畸机制目前尚未清楚。有研究[1]发现，在正常腭融合过程中，腭突上皮细胞中E-钙黏素(E-cadherin)的表达受到抑制，导致腭中嵴上皮缝(medline epithelial seam，MES)裂解并形成上皮岛，最终完成腭突融合。E-cadherin是一种重要的黏附分子，在上皮融合过程中发挥重要作用。在此基础上，本研究通过注射DEX于孕鼠腹膜下，研究DEX作用下腭突中E-cadherin基因的表达情况，进一步探讨DEX对腭突发育的影响及导致腭裂的发病机制。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 8周龄C57BL/6J小鼠(购自四川大学实验动物中心)，质量25～30 g，雌雄分笼饲养于SPF级动物房。实验动物自由摄食饮水，给予充足食物。饲养房的温度为20～25 ℃，分别给予光照与黑夜12 h，相对湿度20%～30%。雌雄合笼过夜，比例为2∶1，于晚18:00合笼，并于次日早7:30检查雌性小鼠的阴栓，查见阴栓之日定为孕0 d(embryonic day，E0)，称重放入空笼饲养并做好记录。对E10.0的小鼠再次称重，如体重增加2 g以上则确定怀孕。

    1.1.2 实验试剂和器材 生理盐水(normal sodium，NS)(湖南科伦制药公司)，DEX(Sigma公司，美国)，兔抗鼠E-cadherin抗体和试剂盒(ZYMED公司，美国)等。体视显微镜、光学显微镜，由四川大学口腔疾病研究国家重点实验室提供。

    1.2 实验方法

    1.2.1 实验分组及给药 孕鼠随机分为实验组和对照组，每组8只。实验组及对照组孕鼠于E10.0—E12.0每天称重后分别于腹膜下注射DEX和NS，DEX剂量为6 mg·kg-1，NS为每只0.1 mL ......