张洋洋 何金枝 徐欣 周学东

    1.新疆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科，乌鲁木齐 830054；2.口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院(四川大学)，成都 610041

    龋病是口腔细菌、可发酵的碳水化合物和易感牙齿经长时间复杂的相互作用而发生局部破坏的感染性疾病[1]。近年来多个国家的流行病学数据表明龋病患病率正显著增加，人们面临一场严峻的公共健康危机[2]，因此龋病的防治应引起全世界更多的重视。目前关于口腔健康研究中的对象多数是儿童，而关于青少年口腔健康的数据非常少[3]。我国第二次全国口腔健康流行病学抽样调查报告显示，12岁青少年的患龋率为48.32%；15岁青少年的患龋率为55.70%；18岁青少年的患龋率男性为55.32%，女性为60.11%[4]。我国第三次全国口腔健康调查报告显示，12岁青少年的患龋率为28.90%，与前次调查结果相比，虽然情况有所好转，但口腔健康状况并没有从根本上得到改善。因此，关注青少年口腔健康、了解青少年龋病状态下口腔细菌多样性的变化对于青少年这一特定群体龋病的防治是非常必要的。

    龋病发生的环境因素非常复杂，目前已经达成的医学共识就是微生物因素：口腔微生物代谢碳水化合物产酸，导致釉质表面的脱矿和再矿化过程失衡[5]。研究口腔内定植细菌种类及其致病潜能是防治龋病的基础[6]。对不同疾病状态下口腔微生物组成多样性的认识，能够更好地揭示疾病的发病机制[7]。唾液细菌可作为口腔微生物的“指纹”，指示口腔生境内微生物菌群结构的变化[8]，且唾液易于采集、保存和运送，并可减少患者的焦虑和不适。

    环境样本中超过99%的细菌无法在实验室进行培养[9]。变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE)结合聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)不仅能够检测可培养细菌，还能够检测出一些稀有的、难培养的细菌，进而更有效地评估微生物多样性和比较不同环境微生物群落结构的差别。近年来，DGGE技术广泛应用于微生物多样性研究中，涉及湿地[10]、草地[11]和食品[12]等各个领域，在口腔微生物多样性研究中的应用也日趋增多，如龋病[13-14]、牙髓及根尖周病[15-17]和牙周病[18]患者的口腔微生物多样性研究等。本实验以唾液为样本，采用PCR-DGGE指纹图谱技术对不同龋状况青少年的唾液样本进行研究，通过分析不同龋状况青少年的唾液细菌多样性差异，初步了解青少年龋病状态下口腔微生物组成的群体性改变，为针对龋病特定人群进行有效防治提供理论依据 ......