许可 赵艳红 李洪发

    天津医科大学口腔医院正畸科，天津 300070

    ·基础研究·

    模拟体液仿生矿化法制备的羟磷灰石-壳聚糖支架的性能研究

    许可 赵艳红 李洪发

    天津医科大学口腔医院正畸科，天津 300070

    [摘要]目的 应用模拟体液(SBF)仿生矿化法制备羟磷灰石(HA)-壳聚糖支架，探讨矿化时间对HA-壳聚糖支架结构及细胞相容性的影响。方法 应用冷冻干燥法制备壳聚糖支架，将该支架应用交替浸泡法进行预钙化，然后浸入SBF中进行矿化，控制矿化时间分别为7、14、21 d，即为3组实验组，以单纯壳聚糖支架为对照组，检测4组支架的理化性质。再将经过成骨诱导后的脂肪基质干细胞(ADSCs)接种到HA-壳聚糖支架上，检测不同矿化时间支架的细胞相容性。结果 矿化14 d，HA-壳聚糖支架的矿化物分布均匀，晶体组成符合HA特征，压缩弹性模量随着矿化时间的延长而增强，在矿化21 d时其压缩弹性模量与对照组的差异具有统计学意义(P<0.05)。矿化14 d，ADSCs的增殖量最多，与其他实验组的差异均有统计学意义(P<0.05)；其钙离子和Ⅰ型胶原的分泌量也最多。结论 SBF仿生矿化法可用于制备HA-壳聚糖骨组织工程支架，该支架在SBF中矿化14 d左右时其生物相容性及理化性质可达到最佳状态。

    [关键词]仿生矿化； 羟磷灰石； 壳聚糖

    传统口腔颌面部的骨缺损修复方法有自体骨移植及同种异体骨移植，然而，供体组织的有限性以及可能出现的排异反应限制了该方法在临床上的应用[1]。

    口腔骨组织工程为口腔颌面部骨缺损修复带来了契机。羟磷灰石(hydroxyapatite，HA)是最常用于口腔颌面部骨缺损修复的合成材料。在制备组织工程支架的过程中，可以采用仿生矿化法复合HA与天然高分子，在经过修饰的支架材料上模拟体内的矿化过程[2-4]生成HA。本实验采用模拟体液浸泡生成HA的方法，在壳聚糖有机基质上进行体外溶液浸泡，并进行细胞培养，观察矿化时间对矿化物生成的影响，探讨采用该方法生成的支架的理化性质以及生物相容性。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    1 000 mL模拟体液(simulated body fluid，SBF)，配制方法参见Tadashi等[5]的报道；壳聚糖(90%脱乙酰度)，Ⅰ型胶原蛋白抗体；二抗试剂盒；DAB显色剂，茜素红粉末。

    1.2 方法

    1.2.1 HA-壳聚糖支架的制备 将2%壳聚糖-乙酸溶液冷冻干燥 ......