蔡俊 吕俊 李适庭 高强国 张纲

    第三军医大学附属新桥医院口腔颌面外科，重庆 400037

    降钙素基因相关肽通过抑制Nod样受体蛋白3表达促进小鼠成骨细胞分化的研究

    蔡俊 吕俊 李适庭 高强国 张纲

    第三军医大学附属新桥医院口腔颌面外科，重庆 400037

    [摘要]目的 研究降钙素基因相关肽(CGRP)作用下相关炎症体和信号因子的表达变化，探讨CGRP对成骨细胞分化的作用机制。方法 将不同浓度的CGRP(0、10、30、100 ng·mL-1)加入到成骨细胞中，采用实时聚合酶链反应技术检测细胞内Nod样受体蛋白3(NLRP3)及白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平，蛋白质印迹法检测NLRP3的蛋白表达，酶联免疫吸附测定检测IL-1β的蛋白表达，流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量，茜素红染色显示成骨细胞分化情况。结果 随着CGRP浓度的增加，NLRP3和IL-1β的蛋白表达及mRNA表达均呈降低趋势(P<0.05)，而且细胞内ROS浓度逐渐下降(P<0.05)。100 ng·mL-1CGRP实验组较0 ng·mL-1CGRP对照组显著促进成骨细胞分化。结论 CGRP在一定条件下，可通过抑制细胞内炎症因子的表达促进成骨细胞分化。

    [关键词]降钙素基因相关肽； Nod样受体蛋白3； 白介素1-β； 活性氧； 成骨细胞

    骨折愈合过程中炎症细胞分泌的大量细胞因子刺激成纤维细胞增殖分化、胶原蛋白及血管生成[1]。如果白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)等促炎因子未能得到抑制而过度表达，则会使炎症期延长，从而影响骨折愈合[2]。通过调控IL-1β的表达，降低炎症反应，可达到调控骨愈合的速度。

    降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)作为一种肽类神经递质，可以调节颌骨的生长、发育、修复及改建过程[3]。CGRP主要由感觉神经纤维分泌，成骨细胞自身也能分泌少量的CGRP[4]。研究[5-6]证实，CGRP可调控机体炎症反应及IL-1β的表达，其相关机制为CGRP直接作用于巨噬细胞和树突细胞，抑制这些细胞产生炎性细胞因子和抗原呈递细胞。在免疫细胞中，Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3，NLRP3)的活化能激活中游分子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1，继而诱导下游分子IL-1β的加工与释放[7]。成熟的IL-1β既可活化T细胞，又可激活核转录因子(nuclear factor kappa B ......