周春梅?李淑慧?温齐古丽·乃库力?于莉?袁萍?赵璐?吴佩玲?尼加提·吐尔逊新疆医科大学第二附属医院口腔科，乌鲁木齐?830063

    Notch和Wnt信号通路在自体骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白修复兔牙槽骨缺损中的表达

    周春梅?李淑慧?温齐古丽·乃库力?于莉?袁萍?赵璐?吴佩玲?尼加提·吐尔逊

    新疆医科大学第二附属医院口腔科，乌鲁木齐?830063

    [摘要]目的 通过建立自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合富血小板纤维蛋白(PRF)修复兔拔牙窝骨缺损的动物模型，探讨Notch和Wnt信号通路在牙槽骨缺损修复过程中的表达及意义。方法 选用36只健康雄性2月龄新西兰兔，随机分为4组，均于全身麻醉下微创拔除下颌左侧中切牙。A组植入BMSCs-PRF复合物，B、C组分别植入单一PRF和BMSCs，D组未植入任何材料作为空白对照。术后4、8、12周(每个时间点3只动物)处死动物，立即在骨缺损同一部位取材，制作骨标本，利用免疫组织化学和免疫荧光染色检测骨缺损修复过程中Notch1和Wnt3a的表达情况。结果 免疫组织化学染色结果显示：第4、8周，A、B、C组Notch1和Wnt3a表达均高于D组(P1?材料和方法

    1.1?主要试剂和仪器

    大鼠抗兔一抗Notch1(北京博奥森生物技术有限公司)，大鼠抗兔一抗Wnt3a(Ana?Spec公司，美国)，Envision两步法免疫组织化学试剂盒(DAKO公司，丹麦)；二氨基联苯胺(diaminobenzidine，DAB)、抗体稀释液、封闭用正常羊血清(北京中杉金桥生物技术有限公司)；4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(4’,6-diamidino-2-phenylindole?dihydrochloride，DAPI)(北京高科恒辉技术发展有限公司)；免疫荧光二抗试剂盒(Abbkine公司，美国)。C2型激光扫描共聚焦显微镜(Nikon公司，日本)；DM5000型正置荧光显微镜(Leica公司，德国)；生物组织包埋机(金华益迪医疗设备有限公司)；Microm?HM?315型病理切片机(GMI?公司，德国)。

    1.2?实验方法

    1.2.1?动物模型建立方法 ?健康雄性2月龄新西兰大白兔36只(质量2.5～3.5?kg，新疆医科大学动物实验中心)，随机分为4组，即实验组(A、B、C)和空白组(D)，均于全身麻醉下微创拔除下颌左侧中切牙。A组植入自体BMSCs与PRF复合物BMSCs-PRF，B、C组分别植入PRF和BMSCs，D组拔牙窝内未植入任何材料 ......